4.
利用纤维素解决能源问题的关键,是高性能纤维素酶的获取.请完善实验方案,并回答相关问题.实验目的:比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性.
实验原理:纤维素酶催化纤维素分解为葡萄糖, ,葡萄糖的生成量表示酶活性大小.
实验材料:三种微生物(A、B、C)培养物的纤维素酶提取液,提取液中酶蛋白浓度相同.
实验步骤:(1)取四支试管,分别编号.
(2)在如表各列的一个适当位置,填写相应试剂的体积量,并按表内要求完成相关操作.
管号 试剂(mL) | 1 | 2 | 3 | 4 |
蒸馏水 | 1.4 | 1.4 | 1.4 | |
pH7.5的缓冲液 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
纤维素悬浮液 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 |
微生物A提取液 | 0.1 |
|
|
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微生物B提取液 |
| |
|
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微生物C提取液 |
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| 0.1 |
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总体积 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
(3)将上述四支试管放入37℃的水浴中,保温1小时.
(4)在上述四支试管中分别加入 试剂,摇匀后,进行沸水浴2分钟.
(5)观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅.
实验结果:
| 微生物A提取物 | 微生物B提取物 | 微生物C提取物 |
颜色深浅程度 | + | +++ | ++ |
分析讨论:
①上述结果表明:不同来源的纤维素酶,虽然酶蛋白浓度相同,但活性不同.若不考虑酶的最适pH和最适温度的差异,其可能原因是 .
②你认为上述三种微生物中,最具有应用开发价值的是 .
③从解决能源问题的角度,开发这种纤维素酶的意义在于 .