Ⅰ.培养基的配制∶

PDA培养基∶土豆20%+葡萄糖20%+琼脂2%+水∶

G-PDA培养基∶ PDA培养基+0．04%愈创木酚+100μg/mL氨苄青霉素；

Ⅱ.菌种的分离∶

采集林下土样加入制成土壤悬液，利用法接种于G-PDA培养基平板上，将其于30°C恒温培养箱中培养，每隔24h观察等指标来衡量产漆酶的能力。

Ⅲ.粗酶液的制备∶

将分离出的菌株接种于液体产酶培养基中，30°C恒温振荡培养7d，培养液经离心后取作为粗酶液。漆酶的产量受发酵液初始pH、培养温度、 （至少两点）因素的影响．

Ⅳ.酶的应用∶

游离的漆酶的催化活性易受环境因素等影响，且难以，利用技术，可显著增强漆酶的利用率和对废水中BPA的去除效益。

Ⅰ.途径一∶

①获得目的基因∶若固氮基因片段是已知的，可用或者方法获得。

②形成重组DNA分子并导入受体细胞∶将固氮基因与载体DNA连接在-起，常选用作为该基因的载体使用，之后把形成的重组DNA分子导入植物细胞∶

③筛选与表达∶若受体细胞转入培养基中仍能继续生长发育，说明固氮基因已在受体细胞中表达；

④植物组织培养∶分离上述成功表达固氮基因的单个植物细胞，经过培养基中成分诱导，可发生类似受精卵经过卵裂、分化、和形态建成而发育成胚的过程，之后培养获得具有固氮能力试管苗．

Ⅱ.途径二∶将植物细胞经酶处理得到的原生质体与去壁后的固氮菌进行，再通过培养获得具有固氮能力的试管苗。

Ⅲ.上述两条途径获得的试管苗数量不够，需在初代培养后连续数代扩大繁殖，即过程。

Ⅰ.预处理∶将经去皮的果肉打浆后加入适量果胶酶和柚苷酶，恒温水浴处理，以达到及提高果汁产量的目的。为取得稳定的酶解效果，可以进行处理。经过滤得到果汁，用于酒精发酵。

Ⅱ.酒精发酵∶调整果汁的糖度，加入经的酵母菌液，控温发酵5～8d，定时测定发酵液的残糖量和酒精含量。影响果酒风味的因素除了原料、温度等发酵条件外，还有（至少答两点）。

Ⅲ.醋酸发酵∶将醋酸杆菌接种于酒精发酵液中，进行摇床发酵。如图所示，在110～150r/min范围内，产酸量随转速的增大而增加，是因为发酵液中增加，利于菌体代谢产酸。

Ⅳ.利用橙皮提取果胶过程中，对橙皮进行三种不同预处理∶直接烘干、沸水漂烫后烘干、盐酸浸泡后烘干。然后加入蒸馏水，用盐酸调pH，水浴加热、离心的上层含果胶溶液待用。可以用析出果胶，经过测定发现漂烫处理和酸洗法处理过的橙皮果胶提取率较高，分析其原因是。

Ⅰ.侵染菌液的制备∶将低温保存的菌种用LB液体培养基在适宜温度和转速的上培养以制备生长旺盛的菌悬液。

Ⅱ.需要调节菌悬液光密度值以保证侵染液的适宜，同时将小紫菊组培苗植株中部以上的叶片用处理，然后用取样器吸取20微升菌液滴加于叶片伤口处继续培养以完成转化操作。

Ⅲ.发根农杆菌Ri质粒的T-DNA进入叶片细胞后，叶片细胞经形成毛状根。剪取毛状根顶端生长点，转入不添加激素的MS+头孢霉素培养基中繁殖，每隔一定时间剪取顶端，转入新培养基进行多次培养，上述操作的主要目的是。最后在诱导形成再生植株的过程中应注意调节植物培养箱的温度、光照强度及。

Ⅳ.可根据Ri质粒中相关基因的碱基序列设计引物对获得的毛状根、愈伤组织及再生植株进行以鉴定是否成功转人rol基因。

①液体培养基常采用法进行灭菌，摇床培养的目的是。

②取培养液1mL采用法接种于固体选择培养基上，于28℃恒温箱倒置培养。实验结果见下图。

选择菌落作为高产漆酶菌株，理由是。

聚乙烯（PE）由乙烯（CH₂=CH₂）聚合而成，是农用地膜的主要成分，因其难以被降解，废弃物常造成污染。下图为研究人员筛选PE降解菌的实验流程图。

Ⅰ.该实验应从的土壤中采样，并使用对土壤进行稀释，A组中添加PE为唯一碳源，选择培养的目的是。

Ⅱ.进行扩大培养时，将培养瓶应置于上进行培养，随后进行划线时，发现某个平板第四划线区域无菌落出现，其原因可能有。

Ⅲ.研究小组中有成员建议将筛选得到PE降解菌菌种与特定介质进行结合，形成固定化菌株，优点有（答出两点即可），由于微生物体积较大，不容易被吸附，固定该菌株一般采用法。

Ⅰ.在转基因操作中，一般需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，是为了保证目的基因在受体细胞中。

Ⅱ.现发现有某种新型抗虫性强的玉米植株，通常采用的方法获取抗虫基因。用处理农杆菌使之处于感受态，即细胞能够从周围环境中摄取DNA分子，并且不易被细胞内的识别并切割的一种特殊生理状态。然后与重组质粒在离心管内进行混合等操作，使重组质粒进入农杆菌，完成实验。要进一步筛选转基因玉米植株是否具备抗虫性强的性状，需要，若某植株已成功导入了目的基因却没有抗虫性状，可能的原因是；若让筛选获得的抗虫性强的转基因玉米植株（假设只导入了一个抗虫基因）进行自交，子一代抗虫性强的植株中能稳定遗传的占。