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部编版： 必修1《分子与细胞》
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  • 1． p53基因是一种抑癌基因，在恶性肿瘤患者中突变率达50%以上。与人相比，大象体内含有多对p53基因，推测是其很少患肿瘤的主要原因。设计实验探究人p53基因在乳腺肿瘤细胞中的作用。回答下列问题：

    利用PCR技术扩增p53基因。首先根据p53基因的核苷酸序列，设计并合成，其能与变性p53基因单链结合，在催化作用下延伸，如此循环多次。
    p53基因表达载体的构建。如图所示，表达载体上除了标注的DNA片段外，在p53基因上游还必须拥有的DNA片段（箭头所示）是，其作用机理是。外源p53基因插入载体中至少需要两种工具酶，包括准确切割DNA的限制性核酸内切酶和将双链DNA片段“缝合”起来的。
    乳腺肿瘤细胞培养，完成伦理学审查和病人知情同意书签署后，将患者乳腺肿瘤组织块剪碎，制成细胞悬液在适宜的条件下培养。培养环境中所需的主要气体包括细胞代谢必需的和维持培养液pH值的。保持培养环境处于无菌无毒条件的操作包括（答出两点即可）。
    检测p53基因表达对乳腺肿瘤细胞增殖的影响。分别将空载体和p53表达载体转入肿瘤细胞培养，采用特殊方法检测细胞增殖情况，并从培养的肿瘤细胞中提取蛋白质，用相应的进行杂交，检测p53基因翻译成蛋白质的情况，探索杂交带强度与细胞增殖率相关性。
    难度： 中等 题型:模拟题 来源：湖南省2021年普通高等学校招生全国统一考试模拟演练生物试卷
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  • 2． CRISPR/Cas9基因编辑技术可以按照人们的意愿精准剪切、改变任意靶基因的遗传信息，对该研究有突出贡献的科学家被授予2020年诺贝尔化学奖。我国科学家领衔的团队利用CRISPR/Cas9等技术，将的人亨廷顿舞蹈病致病基因（HTT基因）第1外显子（其中含150个CAG三核苷酸重复序列）“敲入”猪基因组内，获得了人－猪“镶嵌”HTT基因，利用胚胎工程技术成功地构建了亨廷顿舞蹈病的动物模型。回答下列问题：
    PCR技术是获得人HTT基因常用的方法，制备PCR反应体系时，向缓冲溶液中分别加入人HTT基因模板、4种脱氧核糖核苷酸及等，最后补足H2O。
    CRISPR/Cas9基因编辑技术中，SgRNA是根据靶基因设计的引导RNA，准确引导Cas9切割与SgRNA配对的靶基因DNA序列，由此可见，Cas9在功能上属于酶。与CRISPR/Cas9相比，基因工程中的限制酶的特性决定了其具有的局限性。
    在实验过程中，为确认实验猪细胞基因组内是否含有人－猪“镶嵌”HTT基因，常用的检测手段包括PCR技术及。
    含有“敲入”序列的猪胚胎成纤维细胞在体外培养时通过细胞分裂，数量不断增加，当细胞贴壁生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖，这种现象称为。贴满瓶壁的细胞常用进行消化处理，以便进行传代培养。
    将含有“敲入”序列的猪胚胎成纤维细胞的细胞核导入去核的卵母细胞的过程，称为。此后进行体外胚胎培养并移植到代孕母猪体内，最终获得亨廷顿舞蹈病动物模型。
    难度： 中等 题型:模拟题 来源：广东省2021年普通高等学校招生全国统一考试模拟演练生物试卷
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  • 3． 目前广泛应用的新型冠状病毒检测方法是实时荧光RT-PCR技术。RT-PCR是将RNA逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，具体过程如图所示。下列说法错误的是（   ）

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    A: 与该mRNA结合的引物，可以是A也可以是B
    B: 引物A与引物B的基本单位都是脱氧核苷酸
    C: 过程Ⅱ通过控制温度的变化实现目标序列的循环扩增
    D: 该反应体系中应加入逆转录酶、Taq酶等物质
    难度： 中等 题型:常考题 来源：山东省济南市章丘区四中2020-2021学年高三上学期生物8月月考试卷
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  • 4． 草甘膦是一种广谱、内吸、高效的灭生性除草剂，它通过与 EPSPS(叶绿体中的一种酶)结合，抑制 EPSPS的作用，阻断芳香族氨基酸的合成，从而引起细胞死亡。为了提高普通烟草对草甘膦的抗性，科学家通过转基因的方法将某外源EPSS基因转入烟草的叶绿体中，使其产生更多的 EPSPS，使得转基因烟草对草甘膦的抗性可达5mmol/L (比野生型烟草高10倍)。
    体外扩增 EPSPS基因常采用PCR技术，其原理是，PCR过程所需的原料是，利用PCR技术扩增 EPSPS基因的前提是。
    将外源基因导入叶绿体需穿过单层细胞膜和叶绿体双层膜，科研人员为将EPSPS基因导入叶绿体，利用压缩气体产生的动力，将 EPSPS基因包裹在钨粉粒子表面成功打入叶绿体中，该方法被称为。EPSPS基因导入成功后，是否赋予了烟草对草甘膦的预期抗性，还需要对转基因烟草进行的鉴定操作是。
    从生物安全角度分析，叶绿体基因工程与细胞核基因工程相比，安全性更高的原因是。
    难度： 中等 题型:常考题 来源：山东省济南市章丘区四中2020-2021学年高三上学期生物8月月考试卷
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  • 5． 如图为利用生物技术获得生物新品种的过程，有关说法正确的是（   ）

    图片_x0020_100015

    A: A→B过程中一般用4种脱氧核苷酸为原料，并加入两种引物
    B: A→B过程利用了DNA复制原理，需要使用耐高温的DNA聚合酶
    C: B→C为转基因绵羊的培育过程，常选用的受体细胞是卵母细胞
    D: B→D为转基因植物的培育过程，其中④过程常用的方法是农杆菌转化法
    难度： 中等 题型:常考题 来源：江苏省扬州市邗江区蒋王中学2021届高三上学期生物第一次月考试卷
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  • 6． 为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如图）。

    为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因，同时避免内源HMA3基因的干扰，在进行PCR扩增时，应选择的引物组合是（   ）
    A: ①+③
    B: ①+②
    C: ③+②
    D: ③+④
    难度： 中等 题型:真题 来源：2020年北京高考生物真题试卷
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  • 7． 如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列，具体流程如下图（以EcoR I酶切为例）：

    请据图回答问题：
    步骤I用的EcoR I是一种酶，它通过识别特定的切割特定位点。
    步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3′-羟基与5′-磷酸间形成；PCR循环中，升温到95℃是为了获得；TaqDNA聚合酶的作用是催化。
    若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤Ⅲ选用的PCR引物必须是（从引物①②③④中选择，填编号）。
     

    DNA序列（虚线处省略了部分核苷酸序列）

    已知序列

    PCR引物

    ①5′- AACTATGCGCTCATGA-3′

    ②5′- GCAATGCGTAGCCTCT-3′

    ③5′- AGAGGCTACGCATTGC-3′

    ④5′- TCATGAGCGCATAGTT-3′
    对PCR产物测序，经分析得到了片段F的完整序列。下列DNA单链序列中（虚线处省略了部分核苷酸序列），结果正确的是________。
    难度： 中等 题型:真题 来源：2020年江苏省高考生物真题试卷
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  • 8． 微卫星DNA是广泛分布于真核生物基因组中的简单重复序列。由于重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性并且数量丰富，因此，微卫星DNA可以作为分子标记，并有着广泛应用。

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    为了分离捕获到某种生物的微卫星DNA分子标记，可以用生物素标记的特定简单重复序列作为探针，与该生物的（填“基因组”或“cDNA”）文库进行杂交，然后再经多个步骤筛选获取微卫星DNA。
    扩增分离到的微卫星DNA序列的技术方法为，其原理是。其反应体系中含缓冲液、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物、及酶等。
    对微卫星DNA进行体外扩增的基本反应步骤为。
    从图中4种引物中选择正确的引物，并在内用箭头表示子链延伸的方向。
    根据“微卫星DNA”的特点判断，这种分子标记可应用于_____（填字母）。
    难度： 中等 题型:常考题 来源：天津市一中2019-2020学年高一下学期生物期末考试试卷
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  • 9． 用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以下电泳图谱，其中1号为DNA标准样液（Marker），10号为电泳缓冲液。PCR时加入的模板DNA如图所示。据此做出分析不合理的是（   ）

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    A: PCR产物的分子大小在250至500bp之间
    B: 3号样品为不含目的基因的载体DNA
    C: 9号样品对应植株不是所需的转基因植株
    D: 10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果没有干扰
    难度： 中等 题型:常考题 来源：天津市一中2019-2020学年高一下学期生物期末考试试卷
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  • 10． PCR技术扩增DNA，需要用到的酶是（   ）
    A: 限制性核酸内切酶
    B: DNA聚合酶
    C: 蛋白酶
    D: DNA分解酶
    难度： 简单 题型:常考题 来源：天津市部分区2019-2020学年高二下学期生物期末考试试卷
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