万考题-全国中小学题库

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1．下列哪一项不属于克隆（　　）

A: 利用PCR技术扩增目的基因

B: 利用核移植技术培育出克隆绵羊

C: 利用植物体细胞杂交技术培育出杂种植株

D: 利用胡萝卜茎尖组织经植物组织培养得到脱毒苗

难度：中等题型:常考题来源：河北省张家口市一中普通班2019-2020学年高二下学期生物期中考试试卷

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2．生命科学新技术的应用对生物学发展至关重要。下列技术与应用不匹配的是（　　）

A: PCR技术--扩增蛋白质

B: 显微注射技术--培育转基因动物

C: 细胞融合技术--制备单克隆抗体

D: 细胞核移植技术--培育体细胞克隆动物

难度：中等题型:模拟题来源：上海市青浦区2020年高三生物高考一模试卷

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3． Bl-2基因是细胞凋亡抑制基因，可以利用PCR技术检测其转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。如图为克隆猪的培育及Bl-2基因转录水平检测流程，下列说法错误的是（）

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A: 图中A细胞表示去核的卵母细胞，B细胞表示体细胞

B: 在早期胚胎发育的不同时期提取的总mRNA是不同的

C: 图中过程X表示反转录，获得的cDNA可用于克隆猪基因组的测序

D: 在PCR过程中，（Bcl-2 cDNA）/cDNA的值反映Bcl-2基因的转录水平

难度：中等题型:常考题来源：江苏省徐州市一中2019-2020学年高二下学期生物第一次月考试卷

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4．人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值。下图是以基因工程技术获取HSA的两条途径，其中报告基因表达的产物能催化无色物质K呈现蓝色。回答下列问题。

基因工程中可通过PCR技术扩增目的基因。生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是；在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA分子双链间的。

已知碱性磷酸酶能除去核苷酸末端的5磷酸，构建表达载体的过程中用该酶处理Ti质粒，但HSA基因不用碱性磷酸酶处理，这样做的目的是，经过上述处理后的Ti质粒在DNA连接酶的作用下可与HSA基因之间形成个磷酸二酯键，再经相关处理获得结构完整的重组DNA分子。

过程①中需将植物细胞与农杆菌混合后共同培养后，还应转接到含的培养基上筛选出转化的植物细胞。③过程中将目的基因导入绵羊受体细胞，采用最多，也是最为有效的方法是，还可以使用动物病毒作为载体，实现转化。

为检测HSA基因的表达情况，可提取受体细胞的，用抗血清白蛋白的抗体进行杂交实验。

难度：中等题型:模拟题来源：黑龙江省齐齐哈尔市八中2020年高三生物高考一模试卷（理）

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5．下列关于生物工程中常见的几种酶的叙述，不正确的是（）

A: DNA连接酶可把任意目的基因与任意质粒黏性末端的碱基黏合，形成重组DNA

B: 限制酶将一个DNA分子片段切成两个片段需消耗两个水分子

C: Taq酶是用PCR仪对DNA分子扩增过程中常用的一种耐高温的DNA聚合酶

D: 纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生质体，便于植物体细胞杂交

难度：中等题型:常考题来源：河南省林州市一中实验班2019-2020学年高二下学期生物3月月考试卷

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6．人血清白蛋白（HSA）是血浆中含量最丰富的蛋白质，在维持血浆渗透压、抗凝血等方面起着重要作用，具有重要的医用价值。如图是用基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。

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为获取HSA基因，首先要提取人血细胞中的mRNA，利用法合成cDNA，再利用技术进行快速扩增，在这一过程中，需要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成。

构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体时，需要选择水稻胚乳细胞启动子，而不能选择其他物种和组织细胞的启动子，原因可能是。

在利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，为了吸引农杆菌移向水稻受体细胞，需添加物质。

选用大肠杆菌作为受体细胞的优点有（答出两点即可）。但相比于水稻胚乳细胞，利用大肠杆菌获得的rHSA也有一些缺点，请从生物膜系统的角度进行分析。

利用上述方法获得的rHSA不能直接用于临床医疗，你推测的原因是。

难度：中等题型:常考题来源：河南省林州市一中实验班2019-2020学年高二下学期生物3月月考试卷

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7．为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与Ti质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。回答下列问题：

PCR技术所用到的关键酶是，利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，其目的是。

图1是花色基因C两侧被EcoR I酶切后所形成的末端结构，请写出EcoR I酶识别序列并标出切点：（用“↓”表示切点位置）。图2中EcoRI酶所识别的位点应在Ti质粒的片段上。

将导人目的基因的菊花细胞培养成植株需要利用技术，其原理是。

在个体生物学水平上，如何鉴定转基因菊花培育是否成功？

难度：中等题型:模拟题来源：福建省莆田市2020届高三生物高考模拟试卷（3月）

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8．基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段。如图是基因工程示意图，请据图回答下列问题：

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从基因文库中提取的目的基因通过PCR技术进行扩增时，所用的酶与细胞内同类酶的差异在于该酶。

进行①过程时，需用酶切开载体以插入目的基因。若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过表达载体而不能直接将目的基因导人受体细胞，原因是应（答出两点即可）。

若图中宿主细胞为大肠杆菌，一般情况下②过程不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是；已转化的宿主细胞（大肠杆菌）指的是。

真核生物基因（目的基因）在大肠杆菌细胞内表达时，表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解，在实验中应选用的大肠杆菌作为受体细胞，在蛋白质纯化的过程中应添加的抑制剂。

难度：中等题型:常考题来源：广东省珠海市2020年高三下学期生物2月月考试卷

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9．研究人员利用小鼠的单倍体 ES 细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：

注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位点：Amp^r是氨苄青霉素抗性基因，Neo^r 是 G418 抗性基因。

利用 PCR 技术可以扩增目的基因，PCR 反应体系中除含缓冲液、模板 DNA，dNTP（包含 dATP、dCTP、 dGTP、dTTP）、引物外，还应含有；引物应选用下图中的（填图中字母）。

在基因工程操作步骤中，过程①②称为。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的 G418 能有效杀死不具有 Neo^r 的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的 2 种限制酶是（填图中的编号），③处的培养液应添加（填“氨苄青霉素”或“G418”）。

图中桑椹胚需通过技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行处理。

难度：中等题型:模拟题来源：陕西省西安中学2020届高三上学期生物高考二模试卷（理）

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10．含有限制酶的细胞中通常还具有相应的甲基化酶，这两种酶对 DNA 分子有相同的作用序列，但具有不同的催化功能。甲基化酶可以对 DNA 序列进行修饰，使限制酶不能对这一序列进行识别和切割。回答下列问题：

目前，基因工程中使用的限制酶主要是从生物中分离纯化获得的，鉴定其化学本质可用。构建“基因组文库”和“cDNA文库”的过程中需要使用DNA连接酶的是(填“基因组文库”、“cDNA 文库”或“基因组文库和 cDNA 文库”）。

含有某种限制酶的细胞，可以利用限制酶切割外源 DNA，但不破坏细胞自身的 DNA，其原因可能有①；②。

DNA分子复制过程需要引物，引物是一小段。体外扩增DNA的PCR技术的中文名称是，PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可分为变性、复性和延伸三步。在循环之前，常要进行一次预变性，以便

难度：中等题型:常考题来源：吉林省通化市梅河口市五中2020届高三下学期生物高考模拟试卷

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