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部编版： 必修1《分子与细胞》
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  • 1． 下图是利用PCR技术扩增目的基因的示意图，表中是使用引物中的碱基序列。请回答下列问题：

    图片_x0020_100011

    引物对A

    P1  AACTGAAATGTAGCTATC

    P2  TTAAGTCCATTACTCTAG

    引物对B

    S1  GTCCGACTAGTGGCTGTG

    S2  AGCTGGCGTTTAGCCTCG
    PCR中使用的DNA聚合酶与一般生物体内的DNA聚合酶相比，特点是，其作用。
    上图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。在第四轮循环产物中不含有引物A的DNA片段所占的比例为，出现个两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
    PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。上表为两对引物序列，可采用较高退火温度，原因是。
    设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如图），请分别说明理由：

    ①第1组：；②第2组：。

    图片_x0020_100012

    难度： 中等 题型:常考题 来源：江苏省如皋市2020-2021学年高二下学期生物第一次月考试卷
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  • 2． 大肠杆菌β-半乳糖苷酶（Z酶）可催化白色底物（X-gal）水解产生蓝色物质。在pUC18质粒中，LacZ编码Z酶氢基端的一个片段（称为α-肽），该质粒结构及限制酶识别位点如图甲所示。已知α-肽、缺失α-肽的Z酶片段单独存在时均无z酶活性，共同存在时就会表现出Z酶活性。利用图乙中的 DNA 片段与pUC18质粒进行基因工程操作。

    图片_x0020_100021

    获得目的基因后，通过 PCR 技术扩增。PCR反应过程按顺序包括变性、，其中变性过程要将温度加热至，另外，PCR 反应中还需要用的到酶是 。
    限制酶能催化双链 DNA 分子中的断裂。本实验可使用限制酶处理 pUC18 质粒和图乙中的 DNA 片段，再通过连接，获得含目的基因的重组质粒。
    用重组质粒转化大肠杆菌，然后将大肠杆菌接种到含的固体培养基上进行培养，由于未发生转化的大肠杆菌没有该质粒，因而不能在该培养基上不能生长。
    当上述培养基中含有X-gal时，生长出的菌落有蓝色和白色两种类型，其中含有重组质粒的大肠杆菌的菌落颜色为，这是因为。为了保证能通过菌落颜色辨别是否含有重组质粒，本实验作为受体细胞的大肠杆菌中Z酶基因应满足的条件是。
    难度： 中等 题型:常考题 来源：江苏省六校（金湖中学、洪泽中学等）2020-2021学年高二下学期生物第一次联考试卷
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  • 3． 研究表明，每个人的DNA都不完全相同，DNA指纹技术就是利用这一原理，通过比较DNA来识别身份。警方收集犯罪现场及疑犯的DNA，经DNA扩增得到数量较多的相同DNA，再用限制性核酸内切酶将DNA切成若干片段进行凝胶电泳，结果如下图所示。下列有关叙述错误的是（   ）

    图片_x0020_100010

    A: 通过比较，基本可以排除疑犯1的嫌疑
    B: 将DNA切成片段利用了限制性核酸内切酶的高效性
    C: DNA扩增得到数量较多的相同DNA，利用的原理是DNA复制
    D: 不同人的DNA不同主要是因为DNA中的脱氧核苷酸排列顺序不同
    难度： 中等 题型:常考题 来源：江苏省六校（金湖中学、洪泽中学等）2020-2021学年高二下学期生物第一次联考试卷
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  • 4． PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，下列说法不正确的是（　　）
    A: PCR需要在一定的缓冲溶液中才能进行
    B: PCR所用的解旋酶和DNA聚合酶都具有耐高温的特性
    C: PCR 一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变性、复性和延伸三步
    D: 若以某一DNA片段作为模板，5次循环后理论上反应物中应有32个这样的DNA片段
    难度： 中等 题型:常考题 来源：湖北省2020-2021学年高二下学期生物3月月考试卷
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  • 5． “X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如图甲所示。经4轮循环后，产物中有五种不同的DNA分子，如图乙所示，其中第③和④种DNA分子的个数有（　　）

    图片_x0020_100012
    A: 8个
    B: 6个
    C: 4个
    D: 2个
    难度： 中等 题型:常考题 来源：湖北省2020-2021学年高二下学期生物3月月考试卷
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  • 6． PCR技术（多聚酶链式反应）是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程。下列说法错误的是（　　）

    图片_x0020_100015

    A: a过程高温使DNA变性解旋，该过程不需要解旋酶的作用
    B: c过程要用到的酶在高温下失活，因此在PCR扩增时需要再添加
    C: 如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不标记，控制“94 ℃～55 ℃～72 ℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25%
    D: PCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变
    难度： 中等 题型:常考题 来源：湖北省2020-2021学年高二下学期生物3月月考试卷
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  • 7． PCR反应过程中，引物的作用是（　　）
    A: 打开DNA双链，便于复制进行
    B: 提供3'端羟基作为DNA合成的起点
    C: 催化合成DNA子链，以形成新的双螺旋
    D: 提供5'端羟基作为DNA合成的起点
    难度： 中等 题型:常考题 来源：湖北省2020-2021学年高二下学期生物3月月考试卷
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  • 8． 下列有关PCR技术的说法，不正确的是（   ）
    A: PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术
    B: PCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNA
    C: PCR技术的原理是DNA双链复制
    D: 利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列
    难度： 中等 题型:常考题 来源：陕西省榆林市十二中2020-2021学年高二下学期生物第一次月考试卷
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  • 9． 噬菌体抗体库技术可以制备单克隆抗体，其方法是将人的抗体基因插入噬菌体载体，以大肠杆菌作为受体细胞进行表达。抗体可能以与外壳蛋白融合表达的形式位于噬菌体表面，也可能以分泌表达的方式胞外排出。回答下列问题：
    获取人的抗体基因可从活化的B细胞中提取，经逆转录形成cDNA，再利用PCR技术扩增目的基因，有时需要在引物的5'端设计（填“限制酶”“DNA连接酶”或“RNA聚合酶”）识别序列，以便构建重组DNA分子。
    在PCR反应体系中，加入dNTP（dCTP、dATP、dGTP和dTTP）的作用是。
    在噬菌体抗体库的构建过程中，理论上可以不利用Ca2＋处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，依据是。
    从噬菌体抗体库中筛选特异性抗体的方法是，其原理是。与利用杂交瘤技术制备单克隆抗体相比，噬菌体抗体库技术省去了操作，使制备更简单易行。
    难度： 中等 题型:模拟题 来源：河南省2021届高三生物适应性试卷（理）
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  • 10． 荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。下列有关叙述正确的是（　　）

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    A: 引物是单链DNA或单链RNA，引物1、2的碱基序列相同
    B: Taq酶催化DNA的合成方向总是从子链的3'端向5'端延伸
    C: 达到设定荧光强度所经过的循环次数与其起始模板量关系不大
    D: 该项技术可用于检测某种细胞中不同基因的转录水平
    难度： 中等 题型:常考题 来源：江苏省苏州市2021届高三下学期生物学业质量阳光指标调研开学试卷
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