万考题-全国中小学题库

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1．以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是（）

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A: 催化①过程的酶是RNA聚合酶

B: 如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%，则一个双链DNA中，A与U之和也占该DNA碱基含量的40%

C: 催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高温

D: ④过程发生的变化是引物与单链DNA结合

难度：中等题型:常考题来源：陕西省宝鸡市渭滨区2019-2020学年高二下学期生物期末考试试卷

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2．荧光蛋白（GFP）在紫外光下会发出绿色荧光，某科研团队将GFP基因插入质粒P中构建了重组质粒载体P₀ ，用于基因工程中基因表达载体（P₁）的筛选和鉴定。部分过程如下图所示，下表为部分限制酶的识别序列及切割位点。请分析回答问题：

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过程①中，用EcoRV酶切割目的基因获得末端。

过程②是利用技术，多次循环扩增DNA片段，经酶切产生带黏性末端的目的基因。该过程设计的引物5＇端序列必须是，以获得相应的黏性末端，便于P₁的构建和筛选。

过程③中，质粒P₀需用限制酶切割，才能与目的基因在酶的作用下形成P₁。

为了筛选出含有质粒P₁的菌落，需采用添加的培养基进行培养，在紫外光激发下（选填“发出”或“不发出”）绿色荧光的菌落，即为含有P₁的菌落。

难度：中等题型:常考题来源：江苏省盐城市2019-2020学年高二下学期生物期末考试试卷

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3．新型冠状病毒的检测可以采用实时荧光RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）的方法，RT-PCR的具体过程如图。下列有关叙述错误的是（）

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A: 过程①以mRNA为模板合成单链DNA

B: 过程②③拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上需要n个引物B

C: 该技术用于对某些微量RNA病毒的检测，可提高检测的灵敏度

D: 游离的脱氧核苷酸只能从引物的3＇端开始连接

难度：中等题型:常考题来源：江苏省盐城市2019-2020学年高二下学期生物期末考试试卷

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4． 2019年底爆发的新型冠状病毒肺炎（COVID-19）是由SARS-CoV-2病毒引起的，能否快速、准确地检测出病原体成为疾病防控的关键。回答下列问题。

科学家以病毒的RNA为模板通过过程合成cDNA，再对cDNA进行PCR扩增，这项技术称为RT-PCR。

RT-PCR加入Taqman荧光探针可以通过测定荧光强度来检测产物浓度，原理如下：Taqman荧光探针为一段与互补的核苷酸单链、两端分别连接一个荧光基团R和一个淬灭基团Q。探针结构完整时，R发射的荧光被Q吸收；而PCR扩增时结合在模板链上的探针被切断，使R和Q分离，R基团发射的荧光不被淬灭，于是随着DNA扩增次数的增加，荧光的强度会逐渐（填“增大”或“减小”），这样通过对荧光信号强弱的监测就可实现对PCR产物的检测。

新型冠状病毒和SARS病毒都会造成肺炎。下图是SARS-CoVS蛋白（SARS病毒的刺突蛋白）单克隆抗体的制备过程。

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已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。鼠的淋巴细胞有上述两种途径，但一般不分裂增殖；鼠的骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。根据该原理，在含甲的混合培养液中添加氨基嘌呤（填“能”或“不能”）筛选出A，原因是。在SARS-CoVS蛋白（SARS病毒的刺突蛋白）单克隆抗体的制备过程中，需要用到动物细胞培养技术，应定期更换培养液，其目的是；在培养甲的过程中通常在合成培养基中加入血清、血浆等一些天然成分，其原因是。

根据月前的研究推测，SARS-CoVS蛋白单克隆抗体（填“能”或“不能”）对新型冠状病毒发挥作用，理由是。

难度：中等题型:常考题来源：河南省洛阳市2019-2020学年高二下学期生物期末考试试卷

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5．重组人血小板生成素（rhTPO）是一种造血生长因子，如图是科学家培育乳汁中含有rhTPO的羊的相关过程。请回答下列相关问题。

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利用PCR技术对目的基因进行扩增时，利用的原理是。设计引物是PCR技术的关键之一，某同学根据已知的rhTPO基因的核苷酸序列设计的两对引物如下图所示，其中引物对（填“A”或“B”）设计不合理，原因是。

引物对A

P₁ GTCCGCTAGTGGCTGTG

P₂ AGCTGGCGTTTAGCCTG

引物对B

S₁ AAGCCGGGCGCGCGGAA

S₂ TTCGGCCCGCGCGCCTT

HindIII和XhoI两种限制酶切割出的黏性末端不同，将含有rhTPO基因的DNA片段和质粒都通过HindIII和XhoI切割，可以避免。拼接成重组质粒时，需要加入酶才能完成。rhTPO基因能否在羊受精卵细胞中稳定遗传的关键是。

通常需要在胚胎移植前对早期胚胎进行性别鉴定，应从发育到时期的胚胎的中取样做DNA分析性别鉴定。

为了使rhTPO基因只在羊乳腺细胞中表达，在构建基因表达载体时需要在rhTPO基因前端加上。移植的胚胎可以在受体母羊中存活的原因是。

难度：困难题型:常考题来源：河南省洛阳市2019-2020学年高二下学期生物期末考试试卷

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6．转cry1Ab/cry2Aj和G10evo一epsps基因抗虫耐除草剂玉米双抗12-5是浙江大学自主研发的新一代复合性状转基因玉米新品种，该玉米正式获得安全证书。请回答下列问题：

在将目的基因导入植物细胞时常采用农杆菌转化法，在该过程中需要添加酚类物质，作用是。农杆菌的Ti质粒上的T-DNA具有的特点。筛选成功导入目的基因的玉米细胞后，再通过技术获得转基因玉米幼苗。

为获取更多的目的基因，常用PCR技术，该技术的前提是要有，以便合成引物。为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，需在引物的5’端加上限制酶的酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制酶的酶切位点，主要目的是。

不同生物的基因可以“拼接”成功，外源基因可以在不同物种的受体细胞内成功表达，说明了。在抗虫耐除草剂玉米植株的培育过程中，（填“能”或“不能”）用动物病毒作为抗虫耐除草剂基因导入玉米细胞的载体，原因是。

难度：中等题型:常考题来源：河南省焦作市2019-2020学年高二下学期生物期末考试试卷

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7．已知DNA复制时，子链的延伸方向是5'→3'，下图1. 2. 3、4为四种单链DNA片段。使用PCR技术扩增人胸腺素基因时，可选择的引物和该过程所需要的酶分别是（）

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A: 1和4、Taq酶

B: 2和3、Taq酶

C: 1和4、DNA连接酶

D: 2和3、DNA连接酶

难度：简单题型:常考题来源：江苏省扬州市2019-2020学年高二下学期生物期末考试试卷

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8．荧光定量 PCR 技术可定量检测样本中某种 DNA 含量,其原理是：在PCR反应体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当 Taq酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。相关叙述错误的是（）

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A: 引物与探针均具特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则

B: Taq 酶可以催化子链沿着 3'→5'方向延伸，需 dNTP 作为原料

C: 反应最终的荧光强度与起始状态模板 DNA含量呈正相关

D: 若用cDNA作模板，上述技术也可检测某基因的转录水平

难度：中等题型:常考题来源：北京市中央民族大学附中2019-2020学年高二下学期生物期末考试试卷

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9．用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以下电泳图谱，其中1号为DNA标准样液（Marker），10号为蒸馏水。PCR时加入的模板DNA如图所示。据此做出分析不合理的是（）

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A: PCR产物的分子大小在250至500bp之间

B: 3号样品为不含目的基因的载体DNA

C: 9号样品对应植株不是所需的转基因植株

D: 10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果没有干扰

难度：中等题型:常考题来源：北京市延庆区2019-2020学年高二下学期生物期末考试试卷

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10．新型冠状病毒是一种单链 RNA 病毒，新型冠状病毒感染的常规检测方法是通过实时荧光 PCR 鉴定。

首先，从样本中提取病毒RNA，经酶作用生成cDNA。然后以cDNA为模板进行实时荧光PCR扩增，测定样品中病毒核酸量。

通过实时荧光PCR扩增目的基因，需额外添加荧光标记探针（一小段单链DNA，可与目的基因中部序列特异性结合）。当探针完整时，不产生荧光。在PCR过程中，与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶水解，R与Q分离后，R发出的荧光可被检测到（如图 1）。

① 当样本中有目的基因时，引物和探针与目的基因退火，通过形成而特异性结合。

② 在 PCR 循环的阶段，TaqDNA 聚合酶催化子链的合成并水解探针。检测到的荧光强

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在通过实时荧光 PCR 检测新型冠状病毒感染时，检测到的荧光强度变化如图 2 所示。

① 与指数增长期相比，线性增长期目的基因数量的增长率下降，原因有。

② Ct 值的含义：在 PCR 扩增过程中，每个反应管内的荧光信号达到设定的荧光阈值时所经历的扩增循环数。因此，当样本中初始模板越多时，Ct 值就。

③ 某新型冠状病毒核酸检测说明书标明，Ct≤37 判定为阳性，Ct>40 或无 Ct 值判定为阴性。图 2 所示新型冠状病毒核酸检测结果应判定为。

阴性结果也不能排除新型冠状病毒感染。可能产生假阴性的因素有。

a．取样太早，样本中病毒量少，达不到实时荧光 PCR 检测阈值

b．样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解

c．病毒发生变异

难度：中等题型:常考题来源：北京市西城区2019-2020学年高二下学期生物期末考试试卷

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