万考题-全国中小学题库

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1．为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验．

配制好的培养基通常使用法灭菌．步骤③与步骤②中培养基成分相比，最大的区别是．

同学甲进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示．该同学的接种方法是，出现图B结果可能的操作失误是．

同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接人0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57．据此可得出每升样品中的活菌数为个．

步骤⑤需要振荡培养，原因是．

步骤⑤后取样测定石油含量的目的是．

难度：中等题型:模拟题来源：河北省衡水中学2016-2017学年高三下学期生物高考一模考试试卷

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2．如表是筛选异养型细菌的培养基配方．

KH₂PO₄	1.4g
Na₂HPO₄	2.1g
MgSO₄•7H₂O	0.2g
FeCl₃	0.1g
X	1g
维生素	微量
琼脂	15g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL

苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，此培养基中的成分X除为目的菌提供能源外，还能提供，该培养基从作用看属于培养基．制备固体培养基时调节pH在步骤后．

如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，则获得图乙效果的接种方法是．运用图甲所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目．其理由是．

运用图丙方法计数时，已知每个计数室由25×16个小格组成，容纳液体的总体积为0.4mm³ ，观察到图中计数室所示a、b、c、d、e 5个中格共有目的菌80个，则1mL样液中约有目的菌个．

难度：困难题型:模拟题来源：四川省眉山市仁寿一中2016-2017学年高三下学期生物高考三模考试试卷

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3．科学家在深海火山周围的热泉（与地球上早期生命所处的环境类似）中发现大量的硫细菌，从中筛选出能高效产生高温蛋白酶的硫细菌SM06，它通过氧化硫化物过程中释放的能量来同化二氧化碳并进行生长，其筛选过程如图所示．请回答下列问题：

硫细菌SM06的代谢类型为（填“光能自养型”或“化能自养型”）；其细胞结构中具有（填细胞器名称）．

为获得单菌落，可采用法接种．一般对配制的培养基采用高压灭菌，目的是．

接种前，随机取若干灭菌后的空白培养基培养一段时间，这样做是为了．

获得的菌种若要临时保藏，可将菌种接种到试管的培养基上．在合适的温度下培养后放入4℃的冰箱中保藏；若要长期保存，可以采用的方法．

研究热泉生态系统的意义有：（写出两点即可）．

难度：中等题型:模拟题来源：全国2016-2017学年高三下学期生物高考二模考试试卷

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4．从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定．

不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．培养嗜盐菌的菌样应从环境采集．

富集培养指创设仅适合待分离微生物生长的特定环境条件，使其数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．对降解苯酚的微生物的富集培养应选择的培养基．

如图为分离纯化降解苯酚细菌的部分操作步骤．请回答下列问题：

培养基常用灭菌方法是在温度为℃条件下，维持15﹣30min．①是制备培养基时中的主要操作．完成步骤④的操作，接种共需要次的灼烧处理．划线的某个平板经培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落．造成划线无菌落可能的操作失误有．

培养一段时间后，在培养基表面形成多个单菌落，不同菌株降解苯酚能力有差异，需要做降解能力的性能测定，为选出降解能力强的菌株，具体思路是：．

获得分解能力强的菌种后，为了临时保存菌种，把菌种接种在试管的培养基上，在合适温度下培养，等菌落长成后，再放入4℃冰箱保藏．

难度：中等题型:模拟题来源：重庆一中2016-2017学年高三下学期生物高考模拟考试试卷

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5．某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员利用以下两种方法获得了能高效降解化合物A的细菌．

Ⅰ方法一：研究人员利用有机化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基成功筛选到能高效降解化合物A的细菌．实验的主要步骤如图所示，请分析回答：

①培养基中加入化合物A的目的是．

②“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的．实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是．

③在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是．

④转为固体培养时，常采用的方法接种，获得单菌落后继续筛选．

⑤若研究“目的菌”的群体生长规律，将单个菌落进行液体培养，可采用显微直接计数法进行计数．若以一个大方格（体积为0.4mm³）有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为B，菌液稀释倍数为C，那么原菌液的菌群密度为个/mL．

Ⅱ方法二：研究人员通过化学方法合成了高效降解化合物A的某种酶的基因，利用PCR扩增后，采用一定方法导入细菌细胞中，经筛选、培养获得高效降解化合物A的细菌．请分析回答：

①在利用PCR扩增该酶的基因时，在扩增缓冲液中添加4种脱氧核苷三磷酸作为原料而不是脱氧核苷酸，从而使反应体系不需要再加入ATP提供能量，请推测PCR反应合成DNA子链时能量来源于．

②假如PCR反应所用的引物含有放射性、模板不具有放射性，且引物不被切除，则经过n次循环，具有放射性的脱氧核苷酸链占总链数的比值为．

难度：中等题型:模拟题来源：山东省济南市历城二中2016-2017学年高三下学期生物高考模拟考试试卷

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6．长期使用除草剂会污染环境，研究发现一除草剂（有机物）能被土壤中某细菌（M）降解．如图为分离能降解该除草剂的M菌种的过程．请回答下列相关问题：

在液态培养基的基础上制备固体培养基时常用的凝固剂是．

土壤有“微生物的天然培养基”之称．为了获取能降解该除草剂的M菌种，选择的土壤样品应来自．图中①过程所用的培养基中需要加入作为唯一碳源．进行选择培养的目的是．

图中②过程划线所用的工具为，该工具在使用前后都要进行灭菌．

若要检测土样中的细菌含量，应采用法进行接种．先将1mL土壤溶液稀释100倍，然后随机选取4个经灭菌处理的平板，其中3个平板上分别涂布0.1mL稀释液，1个平板未涂布稀释液，适当培养后，4个平板上的菌落数分别为39、38、37和0，则可计算得出每升土壤溶液中的活菌数为个．

难度：中等题型:模拟题来源：广西2016-2017学年高三下学期生物高考模拟考试试卷

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7．如图为兰州环保部门对流经我市黄河中段水域大肠杆菌进行检测的操作和配方图．据图回答下列相关问题：

图甲中滤膜的孔径应（填“大于”或“小于”）大肠杆菌，该计数方法的名称是．

配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐和琼脂以外，还应加入．待各成分都熔化后，调整pH和灭菌，待冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近．大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长呈黑色菌落，从功能上划分，该培养基属于培养基．

用平板划线法分离样液中的大肠杆菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是．

要检测样液中的大肠杆菌含量，取1mL河水样本，加入9mL无菌水，充分混匀后，在5个平板上用涂布平板法分别接入0.1mL样液，在37℃的培养箱中放置48小时，5个平板上的黑色菌落数分别为5、51、50、49、102．据此可得出1mL河水样本中活菌数为个．

难度：中等题型:模拟题来源：甘肃省兰州一中2016-2017学年高三下学期生物高考模拟考试试卷

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8．多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质，呈油状液体，污染土壤后，很难清除．研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用，为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株．

筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品，接种到以为唯一的碳源培养基上，从功能上讲，该培养基属于．

对初步提取到的菌株要进行，一般操作方法有两种，如图是法．

若要测定培养液酵母菌的菌体数，可在显微镜下直接计数．若用法统计菌落数，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是．

将1mL酵母菌溶液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57、58，据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为．

难度：中等题型:模拟题来源：黑龙江省哈尔滨六中2016-2017学年高三下学期生物高考模拟考试试卷

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9．土壤中的纤维素分解菌能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究与应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等．从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程如下：土壤取样→选择培养基→梯度稀释→鉴别培养基

纤维素酶是复合酶，由C₁酶、C_x酶和组成．

实验室中微生物筛选常应用选择培养基的方法，原理是．为分离得到纤维素分解菌，使用的培养基应以作为主要碳源．

梯度稀释前进行选择培养的目的是，这一步一般选用（填“固体”或“液体”）培养基．

梯度稀释后用（仪器）将菌种接种在培养基表面．

用染色法鉴定纤维素分解菌时，培养基上的菌落周围会形成透明圈，其大小反映．

难度：中等题型:模拟题来源：黑龙江省双鸭山市宝清一中2016-2017学年高三下学期生物高考二模考试试卷

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10．某研究小组对长江中大肠杆菌含量进行检测，并研究在高盐度（NaCl）工业废水中提取可降解有机物的耐盐菌，请分析回答有关问题：

大肠杆菌进行检测的操作和配方图如图1所示：图甲中所示大肠杆菌进行活菌计数的方法称为法．

若要将图乙中大肠杆菌检测配方：

修改后用于培养可降解高盐度工业废水中有机物的耐盐菌，则应去除的成分有，同时需要添加的成分是．

将高盐度工业废水采用平板划线法接种在含3%NaCl的固体培养基上（如图2）．然后置于适宜条件下培养一段时间，观察形成的菌落特征；再将分离纯化后的菌株制成菌液，取等量菌液，分别加入到不同NaCl浓度的液体培养基中摇床培养35小时，定时取样统计活菌数目，测定结果（如图3）．

图2所示操作，第一次划线灼烧接种环的目的是防止杂菌污染，第二次及之后的几次划线前灼烧接种环的目的是．图3所示活菌数目在进行统计时，直接从静置的培养液中取样计数的做法是错误的，正确的操作是将培养液后取样计数，且每种浓度需设3个重复实验求其平均值．

由图3可知，该耐盐菌最适合处理含（浓度）NaCl的工业废水，原因是．

难度：中等题型:模拟题来源：四川省泸州市2016-2017学年高三下学期生物高考四模考试试卷

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