万考题-全国中小学题库

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年份	全部 2022 2021 2020 2019 2018 更早

1．回答下列与细菌培养相关的问题。

在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO₃”）。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是。硝化细菌在没有碳源的培养基上（填“能够”或“不能”）生长，原因是。

用平板培养细菌时一般需要将平板（填“倒置”或“正置”）。

单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是。

有些使用后的培养基在丢弃前需要经过处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。

难度：中等题型:真题来源：2019年高考理综生物真题试卷（全国Ⅲ卷）

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2．物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌）。回答下列问题。

要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是。

在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应该选择菌落进一步纯化，选择的依据是。

土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即。

该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。

①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加，三处滴加量相同。

②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明。

难度：中等题型:真题来源：2019年高考理综生物真题试卷（全国Ⅱ卷）

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3．有机磷农药广泛应用于农业生产中，常常因过量施用带来环境污染。某同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物。请回答下列问题:

为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，可在的土壤中取样，若需增加目的菌的浓度，需在相应的培养基中进行(填“选择”或“鉴别)培养。

将获得的等量3种待选菌种甲、乙、丙分别接种在L含20mg有机磷的同种培养液中(其它营养物质保持充裕，条件一直适宜)。记录实验开始到有机磷被耗尽所用的时间，甲、乙、丙分别为32h、45h、16h，应选择微生物(填甲、乙或丙)作为菌种进行后续培养，理由是。

若要测定培养液中的菌体数，既可在显微镜下用直接计数，也可选用法统计活菌数目。

若要长期保存菌种，我们可以采用的方法。

难度：中等题型:常考题来源：四川省绵阳市绵阳南山中学2020届高三上学期生物9月月考试卷

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4．一种广泛使用的除草剂(含氮有机物)在土壤中不易被降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可用一定方法选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明)。

现有一升土壤浸出液，为了对土壤中的细菌进行计数，各取0.1mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养。接种需选择下图工具中的进行实验操作。计数结束记录上述三个培养皿中的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液中菌体数为

在培养基上形成的菌落中，有透明圈菌落利用的氮源主要是，据此可筛选出目的菌。实验结果如右上图显示的A～E五种菌株中，是最理想菌株，判断依据是。

该方法能成功统计菌落数目的关键是选择恰当的，统计的菌落数通常比实际数目低的原因是

难度：中等题型:常考题来源：浙江省名校协作体2020届高三上学期生物第一次联考试卷

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5．请回答下列关于固定化酶和细菌培养实验的问题：

某兴趣小组欲利用固定化酶进行酶解淀粉的实验，分组见表。

组别	固定化酶柱长度（cm）	淀粉溶液的流速（mL·min^-1）
甲	10	0.3
乙	10	0.5
丙	15	0.3
丁	15	0.5

将吸附了 -淀粉酶的石英砂装入柱中后，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去。按上表分组，将配制好的淀粉溶液加入到固定化酶柱中，然后取一定量的流出液进行KI-I₂检测，若流出液呈红色，表明有生成；若各组呈现的颜色有显著差异，则流出液中淀粉水解产物浓度最高的是组。

下列关于上述固定化酶实验的叙述，错误的是_____________。

现有一份污水样品，某兴趣小组欲检测其中的细菌数，进行以下实验。将一定量的污水样品进行浓度梯度稀释。取适量不同稀释度的稀释液，用法分别接种于固体平面培养基上，经培养后进行计数。该实验应注意，接种前，从盛有的容器中将玻璃刮刀取出，放在酒精灯火焰上灼烧，冷却后待用；分组时，需用作为对照。

在上述细菌培养实验中进行计数时，应计数的是接种了______________。

难度：中等题型:常考题来源：浙江省丽水四校2020届高三上学期生物9月月考试卷

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6．下图表示细菌细胞中氨基酸在酶的作用下产生另一种氨基酸的代谢过程，1～6代表不同的氨基酸，V～Z代表不同的酶，所有氨基酸对生命活动都是必需的。某种细菌的原始种只要培养基中有氨基酸1就能正常生长，而该细菌的变异种只有在培养基中有氨基酸1、2、5时才能正常生长，则该变异种中不存在的酶是（）

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A: V、W

B: W、Y

C: Y、Z

D: V、Z

难度：中等题型:常考题来源：浙江省丽水四校2020届高三上学期生物9月月考试卷

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7．微生物培养与分离技术是生物学中重要的实验技术。根据有关微生物的知识，分析回答问题：

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培养基的制备需经过计算、称量、溶化和B：、A：等过程，上述过程中需要在超净工作台上操作的是。

纯化菌种时为得到单菌落，常采用的接种方法是平板划线法和D：，其中需用接种环进行操作的是。

为达到筛选土壤中分解尿素细菌的目的，平板内的固体培养基应以尿素作为唯一的，培养基中加入指示剂培养后，若变红则其中含有所需细菌。若筛选纤维素分解菌，在选择培养后须进行E：和F：过程，一般通过观察的有无挑选出所需菌种。

难度：中等题型:常考题来源：广西壮族自治区桂林市七星区十八中2020届高三上学期理综生物8月月考试卷

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8．自然界中无处不在的金黄色葡萄球菌对人类健康造成影响。典型的金黄色葡萄球菌具有高度的耐盐性，可在15%NaCl培养基上生长；具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低。下面是土壤中金黄色葡萄球菌的分离和纯化实验，请分析回答：

将称好的5g牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量水后加热，待牛肉膏溶化并与称量纸分离后，取出称量纸；往烧杯中加入称好的10g蛋白胨、，用玻璃棒搅拌使其溶解；加入20g琼脂,边加热边搅拌，当琼脂完全熔化后，，补加蒸馏水定容至1000mL。

将上述培养基转移至锥形瓶中灭菌；待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板；将制好的平板放入37℃的温室中培养24～48小时，选用的平板进行后续实验。

称取5g土样，在无菌条件下放入灭菌的锥形瓶中，加入50mL无菌水，再加入0.2mL 磺胺类药物，振荡10min，既使土样充分混匀，又杀死其他细菌。从锥形瓶中取5mL上清液放入无菌试管中，温度30℃、转速200rpm摇床振荡培养24h。如是培养的目的是。

取培养好的菌液，按梯度稀释法依次制备成10、100、1000、10000倍稀释液。分别取0.2mL相关稀释液用法接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，置于37℃培养箱中培养24h。同学在某一稀释度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为33、212和256，该同学以这三个平板上菌落数的平均值167作为统计结果。该做法（填“正确”或“不正确”）。

从平板上的菌落中挑取适量菌种，用划线法接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，置于适宜温度培养箱中培养24h，得到如图所示结果，则划线操作过程中接种环灼烧了次。