下列是有关基因工程和细胞工程的问题，请据图分析回答．

科学家通过基因工程，成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株﹣﹣抗虫棉，其过程大致如图所示．

（1）细菌的基因之所以能“嫁接”到棉花细胞内，原因是 ．

（2）上述过程中，将目的基因导入棉花细胞内使用了 法，这种导入方法较经济、有效．目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是 ，还需要通过检测才能知道，检测采用的方法是 ．

（3）利用基因工程技术培育抗虫棉，相比诱变育种和传统的杂交育种方法，具有 和 等突出的优点，但是目前基因工程仍不能取代传统的杂交育种和诱变育种．与基因工程技术相比，杂交育种和诱变育种方法主要具有 的优点．

（4）某棉农在食用该抗虫棉种子压榨的棉籽油炒芹菜后，出现鼻塞流涕，皮肤骚痒难忍症状．停用一段时间后这些症状会自然消失，该现象很可能是

请回答有关下图的问题：

（1）图1中①～⑤所示的生物工程称为蛋白质工程．该工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过对 的修饰或合成，对现有蛋白质进行改造，或制造出一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求．

（2）图1中④所示过程遵循的碱基互补配对原则不同于翻译过程的是 （请将模板链上的碱基写在前面）．

（3）若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，则构建基因表达载体时，图2中序号[1]代表的是乳腺蛋白基因的 ；且在图1中⑨过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体 的精子．

（4）图中[3]的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．

（5）为获得较多的受精卵进行研究，图1中⑥过程一般需要对供体用 激素处理，使其超数排卵；为提高培育成功率，进行⑩过程之前，要对供、受体动物做 处理．

（6）对早期胚胎进行 技术，可获得同卵双胎或多胎．

人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体．已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原．疫苗生产和抗体制备的流程如图：

（1）过程①代表的是 ，过程③构建A基因重组载体时，启动子和终止子是重新构建的，其应该能被受体细胞的 所识别，以便于其转录．

（2）在将X进行扩大培养之前，至少需要经过两次筛选，方法分别是用 和 

（3）以实验操作过程中用到的技术有 （至少写三个）．

（4）在给小鼠皮下注射A蛋白时，要重复注射几次的目的是 ．

（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 来制备疫苗．对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较，或用图中的 与分离出的病毒进行特异性检测．

（1）哺乳动物的体外受精主要包括 、 、  等主要步骤．

（2）在对胎儿进行β地中海贫血症的产前基因诊断时，要先从羊水中的胎儿细胞提取DNA进行PCR扩增，然后用限制酶对扩增产物进行切割，产生多个片段的酶切产物，再根据不同长度的酶切产物在电泳时移动的速率不同，形成不同的电泳条带进行判断．

①PCR扩增与体内DNA复制过程中，解旋的方法不同，前者通过解开双链，后者通过解开双链．

②一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，大多数限制酶的识别序列由 个核苷酸组成．DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，即黏性末端和平末端．当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是 ．

③利用PCR扩增目的基因也是目的基因获取的方法之一，除此以外，目的基因还可以从基因文库中获取，基因文库包含和 等类型，后者的基因中含有启动子．

④基因诊断的主要原理是 ．

为治疗某种遗传性糖尿病，研究人员完成如下工作．

（1）图1中①是取自患者体细胞的  ， 过程②表示 技术．

（2）图1中过程③表示 技术，此过程需要用到的工具是 ．

（3）为检测胰岛样细胞是否具有胰岛B细胞的正常生理功能，研究人员分别控制甲、乙两组培养液中 的浓度，将胰岛样细胞先后放在甲、乙两组培养液中，保温相同时间后检测胰岛素的分泌量．若诱导成功，则图2中甲组应为 情况下测得的胰岛素分泌量，理由是

本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素．所用的人胰岛素基因是根据植物“偏爱”的密码子设计，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成．将该基因置于CaMV ³⁵S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素．并且在胰岛素﹣COOH端加上KDEL内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解．

（1）根据上述专利摘要，本发明中所用的人胰岛素基因是采用的 方法获得，获得的目的基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列 ．（填“相同”或“不同”）

（2）本发明中，转基因操作时所用的载体是，载体上的T﹣DNA可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．构建的基因表达载体中应含有下列哪些结构 ．（多选，填编号）

①终止密码子             ②内含子滞留序列     ③CaMV ³⁵S启动子

④果实专一性启动子2A12    ⑤标记基因          ⑥终止子          ⑦引物

⑧复制原点               ⑨内质网滞留序列     ⑩目的基因

（3）通过农杆菌介导的方法将人胰岛素基因转入番茄中的具体操作是：用含有基因表达载体的农杆菌感染番茄植株的损伤部位，伤口处的番茄植株细胞会分泌大量的 ，吸引农杆菌移向这些细胞．通过农杆菌的作用，就可以使目的基因进入番茄植株细胞，并将其插入到番茄植株细胞中染色体的DNA上．

（4）请从人体相关生理分析，吃这种转基因番茄能否治疗人类的Ⅰ型糖尿病？ （填“能”或“不能”）．原因是：

生物技术与我们的生活息息相关．

（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，原因是玫瑰精油具有 的性质．

（2）使用加酶洗衣粉时，水温过低或过高时洗涤效果不好的原因分别是 ．

（3）固定化酶的优点是既能与反应物接触，又能与 ．酶的固定化一般适合采用 法和 法．

（4）PCR技术能把某一DNA分子片段进行扩增，依据的原理是 ；每次循环需要经过 、复性、延伸三步．

（5）DNA指纹图谱可用于亲子鉴定．如图为某孩子已故母亲和四位男性的DNA指纹图谱．F₁～F₄中，该小孩生理学上的父亲最可能是 ．

资料甲：科学家生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”．

资料乙：科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接，实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造，生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠﹣人嵌合抗体，用于癌症治疗．

资料丙：治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中，构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗．

（1）资料甲属于基因工程的范畴．构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生 末端．若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生（相同、不同）黏性末端的限制酶．

（2）构建的表达载体含有牛生长激素基因及其启动子等，其中启动子的作用是 ．将基因表达载体导入小鼠受精卵内常用 法．

（3）资料乙属于基因工程和细胞工程的范畴．鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞，在诱导剂的作用下与 融合，形成杂交瘤细胞，并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体．这种抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点是 ， 可大量制备．

（4）资料丙中治疗性克隆采用的技术有、 和干细胞培养．

（5）ES细胞可从重组胚胎培养到囊胚时期的中分离．在培养液中加入可诱导ES细胞定向分化成所需的各种特定类型细胞．

（1）在进行植物组织培养的过程中，除了提供水分和必要的有机营养物质外，还需要在培养基中加入和 ． 同时，培养过程中，除保证必要的温度、光照和氧气等外界条件外，还必须保证的关键条件是 ．

（2）应用基因工程、克隆等技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳汁生产血清白蛋白的过程中，首先需要构建基因表达载体，做法是将基因与 的等调控组件重组在一起，再将构建好的基因表达载体导入到 细胞中．

（3）某养殖户把自己的养鸡场、养猪场、鱼塘和桑园也纳入某一已经构建好的生态园，并把很多单个生产系统通过优化组合有机地整合在一起，改善了系统的功能，这体现了生态工程原理．

（4）下列有关生物技术安全性的叙述，正确的是 

A．一旦发现转基因生物出现了安全性问题，要马上停止实验，并销毁重组生物

B．人们对转基因食品的担心，从某些实例来看是多余的

C．转基因生物带来的安全性问题主要包括基因安全、环境安全、生物安全

D．由于生殖隔离，转基因农作物肯定不会将目的基因传给杂草

A．目前科学家对基因结构、基因间的相互作用及基因调控机制了解有限

B．目的基因是异种生物的基因

C．外源基因插入宿主基因组部位是随机的

（2）下列技术或研究中可能或必须用到胚胎移植技术的是 ．中国政府明令禁止的是 的研究．可能引起基因歧视的是 的研究．设计试管婴儿与试管婴儿的区别是，设计试管婴儿在胚胎植入前需对胚胎进行 ．

A．基因工程     B．细胞工程      C．胚胎工程       D．治疗性克隆

E．生殖性克隆   F．试管婴儿      G．设计试管婴儿   H．基因身份证．