万考题-全国中小学题库

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1．图1是基因工程获取目的基因过程，图2是荧光探针PCR技术示意图，请回答：

将一定范围大小的DNA片段分别与载体连接，导入的群体中储存，这个群体包含这种生物所有基因，因此③叫文库．

获取目的基因除了图1上述途径外，还可以通过获取．

图1中经途径②获取的目的基因，在构建基因表达载体时，除目的基因和标记基因外，还必须有、等调控组件．

图2是荧光探针PCR技术：PCR扩增时加入特异性荧光探针，探针完整，荧光信号无法被监测．当探针被热稳定DNA聚合酶（Taq酶）降解，荧光信号可被监测，每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成．

①设计引物时不能有连续多个碱基自身互补，如图3核苷酸序列（填“适合”、“不适合”）做引物．

②该技术Taq酶的作用是将探针降解外，还能连接DNA片段与单个脱氧核苷酸形成键．

③荧光探针PCR技术优点表现在：通过检测荧光强度，．

难度：中等题型:模拟题来源：2017年福建省三明市高考生物模拟试卷（5月份）

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2．科学家尝试使用Cre/loxP位点特异性重组系统，在检测目的基因导入成功后，删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因．其技术过程如下（图中的■代表基因前的启动子），据图回答：

loxP是一种只有34个碱基对构成的小型DNA片段，是有两个13个碱基对反向重复序列和中间间隔的8个碱基对序列共同组成，自身不会表达，插入质粒后也不影响原有基因的表达，其碱基序列如图：

Cre酶能特异性地识别此序列并在箭头处切开loxP，其功能类似于基因工程中的酶．从遗传学角度分析，Cre酶改变质粒产生的结果相当于可遗传变异中的．

将重组质粒导入到植物细胞中最常用的方法是．作为标记基因，抗除草剂基因用于检测目的基因是否导入成功的原理是．

经检测成功后，抗除草剂基因已没有用途，继续留在植物体内可能会造成的安全问题是．经Cre酶处理后，质粒中的两个loxP序列分别被切开后，可得到如上图右侧的这两个DNA分子．由于的原因，抗除草剂基因不再表达，之后会在培养过程中消失．

loxP序列是有方向性的．如果经Cre酶处理后，发现抗除草剂基因反向连接在质粒一上，则原来质粒一中这两个loxP序列的方向是．

难度：中等题型:模拟题来源：2017年福建省厦门一中高考生物考前模拟试卷

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3．如图表示利用基因工程生产人乳铁蛋白过程，请据图回答：

若可从生物组织中提取到少量含目的基因的DNA，可通过技术扩增出大量该目的基因，它是利用原理，该技术要用到酶．

构建重组载体时应选择图中酶切割含有目的基因的DNA片段和质粒．

②过程是，代孕牛要做处理．

若要生产大量的人乳铁蛋白，可通过或技术增加转基因牛的数量实现．

难度：中等题型:常考题来源：2017年江西省上饶市高考生物一模试卷

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4．基因工程制药是制药行业的一支新军，不仅具有独特的优势，发展速度也很快，如图是应用基因工程构建疱疹病毒亚单位疫苗的方法，请根据图示回答下列问题：

提取单纯疱疹病毒DNA后用酶切取基因作为目的基因，获取目的基因后，要用对其进行扩增．

首先，要已知目的基因的，以便人工合成引物．将过量的引物与目的基因混合，加热到℃，使双链DNA解旋成单链，之后冷却到55﹣60℃，引物与DNA单链结合，下一步，加入和4种脱氧核苷酸，升高温度至70﹣75℃后，完成互补链的合成，如此重复循环多次，直到产生足够供实验用的目的基因．

提取并剪切牛痘DNA，使其与目的基因连接成重组DNA后，在中培养一段时间后，分离出无害的病毒（疫苗），它含有与相同的外壳．

将分离出的疫苗注射到人体内，激活人体的免疫，产生抗体和记忆细胞．

难度：中等题型:模拟题来源：2017年吉林省延边二中高考生物模拟试卷（5月份）

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5．研究人员利用小鼠（2N=40）的单倍体ES细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小鼠，其主要技术流程如图所示：

注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶，箭头指向的位置为限制酶的切割位置；Amp′是氨苄青霉素抗性基因，Neo′是G418抗性基因．

重组质粒上的抗生素抗性基因可作为，其作用是有利于筛选出含有目的基因的细胞，氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo′的小鼠细胞，结合如图推测，过程①选用的2种限制酶是

（选填图中的编号），图中③处的培养液应添加（填“氨苄青霉素”或“G418”）．

若图中过程①选用的2种限制酶识别序列和切割位置分别是

和

，则经这两种限制酶切割后所产生的黏性末端是，此时，图中过程②应选用（填“E•coliDNA连接酶”或“T₄DNA连接酶”）．

据图分析，细胞乙内除线粒体DNA外，还有个DNA分子；细胞乙发育成桑椹胚的过程中细胞分裂方式是，将细胞乙培养成桑椹胚的技术称为技术．

难度：中等题型:模拟题来源：2017年广东省广州市高考生物一模试卷

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6．嗜热土壤芽胞杆菌产生的β﹣葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展并得到了以下试验结果，如图．据图回答相关问题：

已知BglB基因不含图1中限制酶识别序列．PCR扩增bglB基因时，选用杆菌基因组DNA作模板，进行扩增的前提是要有一段已知BglB基因的核苷酸序列以便根据这一序列合成．为使PCR扩增的BglB基因重组进该质粒，扩增的BglB基因两端需分别引入和两种不同限制酶的识别序列．大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为．

根据2、3可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在（填“50”、“60”、“70”、“80”）℃．

在PCR扩增BglB基因的过程中，加入诱变剂可提高BglB基因的突变率．经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因．与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中（多选）．

A．仅针对BglB基因进行诱变 B．BglB基因产生了定向突变

C．BglB基因可快速累积突变 D．BglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变．

难度：中等题型:模拟题来源：2017年湖北省襄阳四中高考生物三模试卷

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7．下面表示科学家培育耐寒生物的过程，请回答：

cDNA文库 $\text{[math]}$ 抗冻蛋白基因 $\text{[math]}$ 更多抗冻蛋白基因 $\text{[math]}$ ② $\text{[math]}$ 受体细胞→耐寒生物