万考题-全国中小学题库

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1．用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶，其中4种限制性核酸内切酶的切割位点如图所示。

回答下列问题：

常用的DNA连接酶有E. coli DNA连接酶和T₄DNA连接酶。上图中酶切割后的DNA片段可以用E.coli DNA连接酶连接。上图中酶切割后的DNA片段可以用T₄DNA连接酶连接。

DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征，如质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能；质粒DNA分子上有，便于外源DNA插入；质粒DNA分子上有标记基因（如某种抗生素抗性基因），利用抗生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞，方法是。

表达载体含有启动子，启动子是指。

难度：中等题型:常考题来源：广东省揭阳市和丰顺县2021-2022学年高三3月月考生物试卷

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2．下列关于基因工程技术的说法，正确的是（）

A: 基因工程中，天然的质粒可以直接被用作运载体

B: 载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达

C: 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能表达

D: 人胃蛋白酶基因在大肠杆菌中表达，产生的胃蛋白酶具有生物活性

难度：中等题型:常考题来源：安徽省淮南市安丰高中2021-2022学年高二下学期第二次教学检测生物试卷

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3．下面是质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp^r为氨苄青霉素抗性基因，tet^r为四环素抗性基因，箭头表示限制性核酸内切酶的酶切位点。若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组质粒的细胞，应选择合适的酶切位点是（）

A:

B:

C:

D:

难度：中等题型:常考题来源：安徽省淮南市安丰高中2021-2022学年高二下学期第二次教学检测生物试卷

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4．下列关于基因工程的叙述，正确的是（）

A: 目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物

B: 限制性核酸内切酶、DNA连接酶及载体是基因工程中常用的工具酶

C: 若检测培育的抗虫棉花是否成功，可用相应的病菌侵染棉花植株

D: 载体上的抗性基因有利于检测目的基因是否插入到受体细胞的染色体上

难度：中等题型:常考题来源：安徽省淮南市安丰高中2021-2022学年高二下学期第二次教学检测生物试卷

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5．科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草．下图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关的酶切位点．请分析回答下列问题：

在该过程中，研究人员首先获取了抗盐基因（目的基因），并采用PCR技术对目的基因进行扩增，该技术需要的条件是引物、酶、原料、模板，该技术必须用Taq酶；然后构建基因表达载体，基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外，还需具有。目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是。

用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaⅠ酶切割，原因是，图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用酶对外源DNA，质粒进行切割。

为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的作探针进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是

难度：困难题型:常考题来源：安徽省淮南市安丰高中2021-2022学年高二下学期第二次教学检测生物试卷

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6．小麦纯合自交系川农16具有穗大、粒多、抗病等优良特性，可通过导入抗除草剂基因bar使其获得抗除草剂性状，具体技术路线如图所示。其中抗除草剂基因bar来源于野生型植物甲，抗草甘膦基因aroA是选择标记基因，报告基因能在特定情况特定组织中表达。

图中构建表达载体的过程需要用两种不同的限制酶切割，比用一种限制酶切割的优点是。很多启动子具有物种特异性，在图中Ti质粒的T-DNA中插入除草剂抗性基因bar时其上游启动子应该选择。

A．野生植物甲启动子 B．农杆菌启动子 C．小麦川农16的启动子

农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选已转化的愈伤组织，需使用含的选择培养基。但在转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织，出现蓝色的是。

①无农杆菌附着的未转化愈伤组织

②无农杆菌附着的转化愈伤组织

③农杆菌附着的未转化愈伤组织

④农杆菌附着的转化愈伤组织

转化后经筛选的愈伤组织需转换培养基继续培养，此时培养基需添加的植物激素为，部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是。培养获得的转基因植株不一定稳定遗传，须将转基因植株进行，继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合系。

T-DNA序列可随机插入到愈伤组织DNA中导致插入位点基因功能丧失。上述实验中偶然获得了一个突变体F，产量明显低于小麦川农16。研究者用某种限制酶处理突变体F的DNA，得到图2，若以此为模板进行PCR扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，需选择的引物是。