万考题-全国中小学题库

题型	全部单选题多选题判断题填空题解答题综合题
难度	全部简单中等困难
年份	全部 2022 2021 2020 2019 2018 更早

1． PHB2蛋白具有抑制细胞增殖的作用。为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），大小为0.9kb（1kb=1000碱基对），利用大肠杆菌表达该蛋白。回答下列问题：

为获取phb2基因，提取该动物肝脏组织的总RNA，再经过程得到cDNA，将其作为PCR反应的模板，并设计一对特异性引物来扩增目的基因。

图1为所用载体图谱示意图，图中限制酶的识别序列及切割位点见下表。为使phb2基因（该基因序列不含图1中限制酶的识别序列）与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端分别引入和两种不同限制酶的识别序列。经过这两种酶酶切的phb2基因和载体进行连接时，可选用（填“E.coliDNA连接酶”或“T₄DNA连接酶”）。

相关限制酶的识别序列及切割位点

名称	识别序列及切割位点	名称	识别序列及切割位点
HindⅢ	A↓AGCTT TTCGA↑A	EcoRI	G↓AATTC CTTAA↑G
PvitⅡ	CAG↓CTG GTC↑GAC	PstI	CTGC↓AG GA↑CGTC
KpnI	G↓GTACC CCATG↑G	BamHI	G↓GATCC CCTAG↑G

注：箭头表示切割位点

转化前需用CaCl₂处理大肠杆菌细胞，使其处于的生理状态，以提高转化效率。

将转化后的大肠杆菌接种在含氨苄青霉素的培养基上进行培养，随机挑取菌落（分别编号为1、2、3、4）培养并提取质粒，用（2）中选用的两种限制酶进行酶切，酶切产物经电分离，结果如图2，号菌落的质粒很可能是含目的基因的重组质粒。

注：M为指示分子大小的标准参照物；小于0.2kb的DNA分子条带未出现在图中

将纯化得到的PHB2蛋白以一定浓度添加到人宫颈癌细胞培养液中，培养24小时后，检测处于细胞周期（示意图见图3）不同时期的细胞数量，统计结果如图4。分析该蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖可能的原因是将细胞阻滞在细胞周期的（填“G₁”或“S”或“G₂/M”）期。

难度：困难题型:真题来源：2021年高考生物真题试卷（辽宁卷）

解析收藏试题篮

2．乙型肝炎病毒是一种DNA病毒。1991年，原卫生部发布《全国乙肝疫苗免疫接种实施方案》，决定在全国推行乙肝疫苗接种。30年来，在社会各界的努力之下，儿童乙肝感染率已降至0．32%。科学家利用基因工程的方法将乙肝病毒表面抗原SS1基因导入马铃薯细胞，从而获得了能产生乙肝疫苗的马铃薯幼苗。回答下列问题：

在基因工程中常用质粒作为基因的载体，这是因为质粒具有(答出2点)的特点。

限制酶能将DNA每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的化学键断开，从而产生黏性末端或平末端，能连接黏性末端和平末端的DNA连接酶是。

将SS1基因导入马铃薯细胞常用的方法是，这能使SS1基因插入马铃薯细胞的上，有利于转化。

要检测SS1基因在受体细胞中是否转录出mRNA，检测方法是采用，检测中需要用标记的作探针。用转SS1基因马铃薯植株的叶片饲喂家兔，如果在家兔血清中检测到，说明转基因植物疫苗初步获得成功。

难度：中等题型:常考题来源：贵州省部分学校2022届高三生物8月联考试卷

解析收藏试题篮

3．人类γ基因启动子上游的调控序列中含有 BCL11A 蛋白结合位点，该位点结合 BCL11A 蛋白后，γ基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列，解除对γ基因表达的抑制，可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，以确定 BCL11A 蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。

为将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达，需在引物末端添加限制酶识别序列。据图可知，在 F₁～F₇末端添加的序列所对应的限制酶是，在 R 末端添加的序列所对应的限制酶是。本实验中，从产物扩增到载体构建完成的整个过程共需要种酶。

将构建的载体导入除去 BCL11A 基因的受体细胞，成功转化后，含 F₁～F₆与 R 扩增产物的载体表达荧光蛋白，受体细胞有荧光，含 F₇与 R 扩增产物的受体细胞无荧光。含 F7 与 R 扩增产物的受体细胞无荧光的原因是。

向培养液中添加适量的雌激素，含 F₁～F₄与 R 扩增产物的受体细胞不再有荧光，而含 F₅～F₆与 R 扩增产物的受体细胞仍有荧光。若γ基因上游调控序列上与引物序列所对应的位置不含有 BCL11A 蛋白的结合位点序列，据此结果可推测，BCL11A 蛋白结合位点位于，理由是。

难度：中等题型:真题来源：2021年高考生物真题试卷（山东卷）

解析收藏试题篮

4．如图为某生物工程操作流程模式图，请据图回答下列问题：

若该图表示植物体细胞杂交，①过程须先利用去除细胞壁，并用(诱导剂名称)诱导，所获得的C的名称是，②过程所用培养基中除一定营养物质外，还需要添加，以获得新的植株。

若该图表示单克隆抗体的制备，A代表注射特定抗原后的淋巴细胞，B代表。用特定的选择性培养基进行筛选后，保留下的C具有的特点是。

若该图中A表示获取的目的基因，则过程①为。其组成必须有以及标记基因等。

难度：中等题型:常考题来源：广东省揭阳普宁市普师高中校2022届高三上学期生物第一次阶段考试试卷

解析收藏试题篮

5．如图是某种天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(标示了部分基因及部分限制酶的切割位点)，据图分析下列说法正确的是(　　)

A: 用限制酶Ⅰ和DNA连接酶改造后的质粒导入受体细胞，只能用卡那霉素进行筛选

B: 用限制酶Ⅱ和DNA连接酶处理后的质粒导入植物细胞，植物细胞无法产生植物激素

C: 构建基因表达载体时，需要在目的基因前端设置相应的启动子，以调控翻译的过程

D: Ti质粒的TDNA片段可将目的基因整合到受体细胞的染色体DNA上，使其稳定遗传

难度：中等题型:常考题来源：广东省揭阳普宁市普师高中校2022届高三上学期生物第一次阶段考试试卷

解析收藏试题篮

6．如图表示获得细胞膜上乙酰胆碱(一种神经递质)受体基因cDNA的操作过程，下列相关分析正确的是(　　)

A: 获得该mRNA的最佳材料是心肌细胞

B: 构建基因表达载体最常用的载体是腺病毒

C: 完成过程①、②必不可少的酶分别是逆转录酶、DNA聚合酶

D: 探针筛选的目的是淘汰被感染的细菌，获得未被感染的细菌

难度：中等题型:常考题来源：广东省揭阳普宁市普师高中校2022届高三上学期生物第一次阶段考试试卷

解析收藏试题篮

7．在基因工程中，为将目的基因导入受体细胞常采用土壤农杆菌转化法，在土壤农杆菌中常含有一个Ti质粒。某科研小组欲将某抗虫基因导入某植物，下列分析错误的是(　　)

A: Ti质粒含有对宿主细胞生存具有决定性作用的基因，是基因工程中重要的载体

B: 用Ca²^＋处理细菌是重组Ti质粒导入土壤农杆菌中的重要方法

C: 重组Ti质粒的土壤农杆菌成功感染植物细胞，可通过植物组织培养技术将该细胞培养成具有抗虫性状的植物

D: 若能够在植物细胞中检测到抗虫基因，则说明将重组质粒成功地导入到了受体细胞

难度：中等题型:常考题来源：广东省揭阳普宁市普师高中校2022届高三上学期生物第一次阶段考试试卷

解析收藏试题篮

8．细胞培养是指在人工模拟环境中，使细胞生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。无论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个必不可少的过程。回答下列相关问题：

储存某种生物的基因离不开基因工程和微生物培养，用特定的酶将某种生物的总DNA切割成含有该种生物不同基因的许多DNA片段，再用酶将这些片段随机地连接在质粒等载体上，然后转移到大肠杆菌或酵母菌等受体菌细胞中储存。各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为。

植物细胞培养过程中，培养基中常需要添加适量的（填激素），以促进细胞的生长和分裂。在反应器中悬浮培养离体细胞可以获得人参皂甙、紫草素等药物成分，此时添加到反应器中的是（填“液体”或“固体”）培养基。

在细胞离体培养中，最困难的是动物细胞培养，它需要支持物、O₂和CO₂、动物血清等条件，动物细胞贴附在玻璃等支持物上生长繁殖的特点称为；提供的CO₂的主要作用是；使用合成培养基培养动物细胞时需要加入血清，原因是。

早期胚胎培养是对动物早期胚胎发育过程的模拟，哺乳动物的早期胚胎发育过程是在（填器官）中开始的。

难度：中等题型:常考题来源：河北省邢台市2021-2022学年高三上学期生物开学试卷

解析收藏试题篮

9．科学家研究发现，两种名为SOX2和OCT4的重要转录因子浓度的波动能决定胚胎干细胞转变的细胞类型。研究者在胚胎干细胞上敲入了几个“报告”基因，这些“报告”基因附在相关基因附近，当细胞中靶向基因表达时，其就会产生荧光信号。利用这种方法，研究人员就能在活体细胞中监测SOX2和OCT4的波动情况，同时还能阐明这些波动如何影响胚胎干细胞的命运。请回答下列问题。

胚胎干细胞具有性，所以可以发育成任何一种细胞。向胚胎干细胞培养液中加入一些转录因子，一段时间后镜检发现培养的细胞呈胰岛样细胞的变化，发生这一变化的根本原因是。

在体外培养胚胎干细胞时，需要在合成培养基的基础上添加等天然成分。同时为了维持培养液的pH值，需要提供的气体环境是。

敲入基因就是将外源基因重组到另一种DNA分子上。在胚胎干细胞上敲入的“报告”基因其实是一种荧光蛋白基因，科学家用同一种限制酶切割荧光蛋白基因和胚胎干细胞的DNA是为了在将“报告”基因“敲入”到胚胎干细胞的DNA上时，还需要用酶连接荧光蛋白基因和胚胎干细胞的DNA之间的键。

请指出本研究在实践应用方面的一个意义。

难度：中等题型:常考题来源：江西省赣抚吉名校2021-2022学年高三上学期生物8月联考试卷

解析收藏试题篮

10．凉山苦荞是四川省凉山州的特产。近年来，依托生物科技扩大苦荞产业，已成为助力当地群众脱贫致富的途径之一。苦荞含有的黄酮类化合物具有降血糖、降血脂等功效。CHS是合成黄酮类化合物的关键酶。某科研团队把经修饰的CHS基因导入苦荞细胞中，培育高产黄酮苦荞品系。据图回答下列问题：

重组Ti质粒中启动子的作用是。

目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。图中的①过程常用Ca²^﹢处理农杆菌，使其成为感受态细胞，即细胞处于一种的生理状态。

若要检测修饰后的CHS基因是否插入到苦荞细胞的DNA上，可以采用技术。要判断高产黄酮苦荞是否培育成功，还需要在个体水平进行鉴定，其操作方向是。为了防止转基因作物的目的基因通过花粉转移到自然界的其他植物中，可设法将目的基因整合到受体细胞的结构中。

某种苦荞因为受到病毒感染而减产，现需要以该苦荞为材料获得脱毒苗，宜选用其茎尖作为外植体，理由是。

难度：中等题型:常考题来源：广东省广州市荔湾区2020-2021学年高二下学期生物期末考试试卷

解析收藏试题篮