万考题-全国中小学题库

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1．硒是一种生命活动必需的微量元素。亚硒酸钠对细菌的生长有明显的毒害作用，土壤中的一些富硒细菌可将其还原为红色单质硒。下图为土壤中富硒细菌的筛选和纯化过程。

请回答下列问题：

在接种土壤样品之前，需要对①中的培养基进行高压蒸汽灭菌。灭菌时间到后，要先切断电源，待灭菌锅内温度自然下降至压力表降到零时再打开排气阀。这样做的目的是。

在取②中的培养液接种到③的培养基表面的过程中，用到的器具除了烧杯、酒精灯之外，还有，从功能上看，③中的培养基属于培养基，在④中，可根据对符合要求的目的菌株进行筛选。

研究者要根据培养基④中的菌落数目来计算出②的培养液中的菌体数目，其依据的原理是：当样品的时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。

上述实验的各个环节都必须做到严格的操作，有些用品还必须进行灭菌处理。灭菌是指。

难度：简单题型:常考题来源：吉林省松原市前郭尔罗斯蒙古族自治县2020-2021学年高二下学期生物期末考试试卷

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2．在生产和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来防止杂菌的污染。下列相关叙述不正确的是( )

A: 玻璃和金属材质的实验器具可采用干热灭菌法

B: 利用平板划线法分离菌种时，若在培养基上连续划线5次，接种环灼烧5次即可

C: 没有将高压蒸汽灭菌锅内的冷空气排尽将影响培养基的灭菌效果

D: 喷洒石炭酸同时配合紫外线照射可提高对超净工作台的消毒效果

难度：简单题型:常考题来源：吉林省松原市前郭尔罗斯蒙古族自治县2020-2021学年高二下学期生物期末考试试卷

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3．将甲、乙、丙和丁四种细菌分别接种到A、B、C、D四种培养液中，经培养后分别测得它们繁殖一代所需的时间，结果如下表所示：

培养液组别	培养液成分	繁殖一代所需时间（分钟）
培养液组别	培养液成分	甲	乙	丙	丁
A	葡萄糖、NaCl、PO₄^3-、MgSO₄	43	100	—	—
B	葡萄糖、NaCl、PO₄^3-、MgSO₄、8种氨基酸	28	40
C	葡萄糖、NaCl、PO₄^3-、MgSO₄、19种氨基酸	25	25	80	—
D	NaCl、MgSO₄、NO₃^-、PO₄^3-	—	—	—	80

注：—表示细菌没有生长

下列相关分析正确的是（）

A: 甲乙相比，均能生长在A培养基，且乙增长较快

B: 甲、乙、丙和丁四种细菌，丁代谢类型与蓝细菌相似

C: 四种培养基均需要通过121℃高压蒸汽灭菌15min

D: 氨基酸是甲、乙、丙、丁四种细菌生长的限制条件

难度：中等题型:常考题来源：浙江省温州市十校联合体2020-2021学年高二下学期生物期末考试试卷

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4．微生物的培养和分离实验通常需要进行高压蒸汽灭菌。下列相关叙述正确的是（）

A: 实验前，采用高压蒸汽灭菌法对接种环、玻璃刮刀进行灭菌

B: 培养基中有尿素时，通过降低高压蒸汽灭菌的压力与温度即可

C: 经高压蒸汽灭菌后的器皿可直接用于微生物实验

D: 实验后的培养基不需要进行高压蒸汽灭菌，直接丢弃

难度：简单题型:常考题来源：浙江省绍兴市2020-2021学年高二下学期生物期末考试试卷

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5．大肠菌群是指一类在35~37 °C条件下培养48 h，能发酵乳糖产酸产气的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌的总称，大肠杆菌属于大肠菌群的一种。我国《生活饮用水卫生标准》中关于生活饮用水的细菌标准是：一、细菌总数1 mL水中不超过100个；二、大肠杆菌数1 L水中不超过3个。国标一般采用多管发酵法检测样品中大肠菌群数，具体分为三步：

蛋白胨	10．0
牛肉膏	3．0
乳糖	5．0
氯化钠	5．0
pH	7．3±0．2
H₂O	定容至1000 mL

①初发酵试验：将待测样品稀释后，选择3个稀释度，每个稀释度分别接种到5支发酵管中，37 °C培养48 h，观察是否产气。

②平板分离：将产气发酵管中的菌液分别接种于伊红美蓝培养基（生长在此培养基上的大肠菌群呈深紫色，有金属光泽）上，置于37°C恒温箱内培养24h，观察菌落形态。

③复发酵试验：挑取平板上呈深紫色，有金属光泽的菌落，进行染色镜检。将镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌的菌株重复初步发酵试验。最后根据证实为大肠杆菌阳性的管数，按统计学原理即可得出大肠菌群数（每升或每100 毫升中的个数）。

初发酵乳糖蛋白胨培养基配方（g/L）如表所示，按物理性质分类，乳糖蛋白胨培养基属于培养基，其中的碳源有

若检测饮用水中的大肠杆菌数，则①步骤无须稀释，原因，①步骤每个稀释度分别接种到5支发酵管中的原因是

②步骤中不能直接用涂布器把菌液涂布在平板上进行大肠菌群计数，原因是

伊红美蓝培养基在配制后通常用法进行灭菌，③步骤中只能挑取符合特征的菌落其中的一小部分进行镜检，这是因为

难度：中等题型:常考题来源：山东省2020-2021学年高二下学期生物期末联考试卷

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6．产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：

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图1所示操作为，所使用的培养基常采用的灭菌方法是。

在图2平板上采用的接种方法是，接种工具为，在3个平板上分别接入0．1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上菌落数分别是36、40、38，则1 g土壤中的酵母菌数约为个。

为了提高酵母菌产酶能力，对分离的酵母菌进行辐射诱变处理。将处理后的酵母菌涂布在以为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径（填“较大”或“较小”）的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。

在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图3所示。据图分析，应选择菌株进行后续相关研究，理由是。

难度：中等题型:常考题来源：江苏省徐州市2020-2021学年高二下学期生物期末考试试卷

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7．植物组织细胞内或细胞间是否存在内生菌?为探究该问题，某兴趣小组分别以豌豆的根、茎、叶等进行相关实验。回答下列问题：

小组成员分别称取了根、茎、叶并用75%的酒精浸泡适宜时间，再用无菌水冲洗，根、茎、叶属于豌豆的结构层次，用 75%的酒精浸泡的目的是，为验证该操作是否已达到目的，可进行的操作是（写出简单思路即可）。

取上述根、茎、叶进行研磨获得滤液，将滤液接种在灭菌后的培养基上并放入恒温箱中培养48h。实验室中对培养皿常采用的灭菌方法为。灭菌后的培养基倒入培养皿后，为防止皿盖上的冷凝水滴落入培养基造成污染，可进行的操作是

实验结果：接种根、茎、叶滤液的培养基上均出现菌落，可根据菌落的等特征判断其是否为同一种菌。接种根部滤液的培养基上所形成的菌落最可能属与菌（写出一种即可），挑取的单菌落可在温度条件为下进行临时保藏。

难度：困难题型:常考题来源：安徽省滁州市明光市2020-2021学年高二下学期期末生物试卷

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8．定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。滤膜法的大致流程如图所示：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到EMB培养基上培养→统计菌落数目。请据图回答问题：

注：EMB培养基的成分：蛋白胨、NaCl、乳糖、水、X和琼脂

EMB培养基中为细菌提供碳源的是，添加的X是，大肠杆菌在含有X的培养基表面长出的菌落呈黑色，从功能上看，EMB培养基属于培养基。

待测水样过滤完之后，还有部分细菌吸附在滤杯杯壁上，将这部分细菌也尽可能集中到滤膜上的操作为：在无菌条件下，用冲洗滤杯，并再次过滤水样。

取10mL待测水样加入90mL无菌水稀释，稀释后取10mL菌液通过滤膜法测得三个平板上的黑色菌落数分别为13、15、17，推测1L待测水样中的大肠杆菌数目为个。

在培养过程中，发现空白对照组的平板上检测到少许菌落，请分析最可能的原因是。

如果在实验组的培养基上添加了青霉素再进行相同的操作，预测检测的大肠杆菌菌落数（填“会”或“不会”）变化，原因是。

难度：中等题型:常考题来源：广东省华附、省实、广雅、深中2020-2021学年高二下学期四校联考生物试卷

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9．产脲酶的细菌可分解尿素。为筛选产脲酶的菌株，科研人员开展了相关研究。

为了筛选可分解尿素的细菌，配置的培养基应选择尿素作为唯一，尿素的灭菌方法是。

称取1g土壤样品，加入99mL中，制备成菌悬液。若用涂布分离法计数细菌的个数，要使所得估计值更接近实际值，应严格操作，多次重复，还应保证对待测样品的比例恰当。取0.1mL10倍稀释的菌悬液涂布在固体培养基上，平均长出了25个菌落，则该样本中每克土壤约有产脲酶的细菌个。

通常筛选菌种时可以通过观察特征对细菌进行初步鉴定。在筛选产脲酶的细菌时，还可以在培养基中添加作为指示剂，产脲酶的细菌在培养基中生长一段时间后，菌落周围指示剂将变成色。

难度：中等题型:常考题来源：浙江省绍兴市诸暨市2020-2021学年高二下学期期末生物试卷

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10．尿素作为主要的化肥种类之一，也是一种重要的化工原料。目前处理含尿素废水的方法有3种：化学热力学水解法、微生物水解法及脲酶水解法。某研究小组欲从土壤中筛选能高效分解尿素的细菌（目标菌）。回答下列问题：

为了筛选能分解尿素的细菌，在配制培养基时需要添加KH₂PO₄和Na₂HPO₄ ，其作用有（答出2点即可）。运用固定化脲酶技术处理含尿素废水时应采用法对脲酶进行固定化。

要从土壤中分离目标菌，关键的实验思路是

为对分离得到的菌种作进一步的鉴定，常在固体培养基中加入酚红指示剂，若菌落周围出现，可以初步鉴定该种细菌为目标菌，其原理是。出现上述变化，选出分解尿素能力强的菌种的思路是：。

难度：困难题型:常考题来源：陕西省安康市2020-2021学年高二下学期期末质量联考生物试卷

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