万考题-全国中小学题库

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1．为增强玉米抗旱性，研究者构建含有某微生物抗旱基因E的重组质粒，用农杆菌转化法转入玉米幼胚组织细胞中，获得抗旱的转基因玉米。下列相关叙述不正确的是（）

A: 提取该微生物mRNA反转录为cDNA，通过PCR可获得大量目的基因

B: 将重组质粒置于经CaCl₂处理的农杆菌悬液中，可以获得转化的农杆菌

C: 用农杆菌转化法将E基因转入玉米幼胚组织细胞需要严格进行无菌操作

D: 用E蛋白的抗体进行抗原-抗体杂交，可在个体水平检测转基因玉米的抗旱性状

难度：中等题型:常考题来源：北京市十三中2020届高三下学期生物开学试卷

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2．利用基因工程生产人胰岛素有两种方法。

方法一：将胰岛素基因转入细菌细胞，进行微生物培养，提取胰岛素；

方法二：将胰岛素基因转入高等哺乳动物的受精卵，培养成转基因动物并从其乳汁中提取胰岛素。

使用方法一时，在细菌细胞中合成的胰岛素原需在（填“蛋白酶”“DNA酶”或“脂肪酶”）的作用下才能变成具有活性的胰岛素；为使胰岛素基因能顺利进入细菌细胞，应用处理细菌细胞，被处理后的细胞称为细胞。

方法二将目的基因导入受体细胞常用的方法是要确保人胰岛素基因只在牛的乳腺动物中表达，应该采取的措施是在人胰岛素基因的首端加上。转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁来生产所需要的药品，因而称为。

用基因工程生产的胰岛素被注射到患者血液中容易被分解，治疗效果会受到影响。科学工作者以胰岛素的结构规律为基础，对胰岛素基因进行修饰，从而对传统胰岛素进行改造，生产出不易被分解的高效胰岛素，这属于生物工程中的范畴。

难度：中等题型:常考题来源：广西壮族自治区桂平市2019-2020学年高二上学期生物期末考试试卷

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3．下列关于基因工程技术的叙述，正确的是（）

A: 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体

B: 质粒是基因工程常用的运载体，不仅存在于细菌中，某些病毒也具有

C: 选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细胞繁殖快

D: 只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达

难度：中等题型:常考题来源：重庆市南岸区2019-2020学年高二上学期生物期末考试试卷

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4．环境雌激素( EEs)严重危害动物和人类的健康。幼年斑马鱼的卵黄蛋白原基因（Z基因）在正常情况下不表达，在EEs的诱导下可表达且表达水平和EEs的浓度呈正相关。为了简便直观地检测水体环境中雌激素污染情况，研究人员培育了一种转基因斑马鱼，部分过程如下。

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请回答：

启动子的作用是。为了获得Z基因的启动子，应从斑马鱼的（填“基因组文库”或“cDNA文库”）中获取。

对Z基因启动子进行扩增前，应设计合适的引物，使扩增后的DNA片段中含有位点，以便Z基因启动子能定向插入原始质粒的正确位置。

获得的重组质粒可通过显微注射到斑马鱼中。为鉴定是否成功导入，应选择含有（填“Z”或“EGFP”）基因的DNA片段作为探针进行检测，理由是。

选取成功导入重组质粒的斑马鱼均分为两组，分别在含EEs、不含EEs的环境培养。一段时间后检测相关基因的表达情况，结果如下。

培养条件	Z基因	EGFP基因
含EEs	+	+
不含EEs	-	-

注：“+”表示相关基因表达、“-”表示相关基因未表达

依据上述结果，说出利用转基因斑马鱼简便直观地检测水体环境中雌激素污染的原理。。

难度：中等题型:常考题来源：福建省厦门市2020届高三上学期生物期末考试试卷

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5．培育乳汁中含有人凝血因子IX医用蛋白的二倍体转基因绵羊的简易流程如图所示。请回答下列有关问题：

图中①表示的过程，为了使目的基因在转基因绵羊的乳腺细胞中成功表达，需将人凝血因子Ⅸ基因与等调控组件重组在一起，且使目的基因的位置处于。

重组细胞的细胞核来自。为了获得绵羊胎儿的单个成纤维细胞，（填“能”或“不能”）使用胃蛋白酶处理绵羊组织块，理由是。

③过程中，采取的方法促使重组细胞的形成。

④过程所用培养液的成分比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需添加（答出三种即可）。

难度：中等题型:常考题来源：河北省邯郸市2020届高三上学期生物期末考试试卷

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6．有些人饮用牛奶后，不能完全消化牛奶中的乳糖。若将乳糖酶基因导入奶牛基因组中，可以使获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖含量大大减少，而其他营养成分不受影响。请回答下列问题：

为了获得乳糖酶基因，可以从人体细胞内提取来合成cDNA，再以cDNA为模板，利用（填中文名称）扩增乳糖酶基因。

质粒载体作为基因工程的运载体，应具备的基本条件有（答出两点）等。按其来源不同，基因工程中使用的DNA连接酶分为两类，即。

将重组表达载体导入奶牛受精卵常用的方法是。为了获得母牛，需对已成功转入目的基因的胚胎进行。

在胚胎移植前，通过技术能获得多个胚胎从而获得多个转乳糖酶基因牛，这体现了早期胚胎细胞的。

难度：中等题型:模拟题来源：湖北省十堰市2020年高三理综生物调研试卷(1月）

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7．现代生物科技中筛选是一个重要过程。请回答下列技术有关筛选问题：

过程③是杂交瘤细胞的培养，在体外培养时培养基中需要提供一定浓度的CO₂ ，目的是。杂交瘤细胞需要经过两次筛选，第一次筛选的目的是。

过程②诱导融合运用的原理是，该过程中区别于植物原声质体融合的方法是用

处理。植物原生质体融合后，需从种两两融合的细胞中筛选出杂种细胞的原声质体。

研究人员采用PCR技术获取酶D基因和转运肽基因，该技术是利用的原理，使相应基因呈指数增加。所含三种限制酶（XbaⅠ、ClaⅠ、SacⅠ）的切点如图所示，则用和处理两个基因后，可得到酶D基因和转运肽基因的重组基因，选用这两种酶的原因是。

难度：中等题型:模拟题来源：广东省茂名市2020年高三理综生物高考一模试卷

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8．利用基因工程等生物工程技术，可从转基因奶山羊乳汁中分离获得人凝血因子Ⅳ，用于血友病的治疗。请回答下列问题：

目的基因的获取方法不是唯一的，若以mRNA为材料人工合成获得凝血因子Ⅳ基因。其具体方法是，构建的基因表达载体应该包括启动子，终止子、等。

将含有目的基因的表达载体导人奶山羊受精卵后，需要进行鉴定和检测来确定基因的表达情况。检测奶山羊乳汁中是否含有人凝血因子Ⅳ，可采用法。除了分子检测外，有时还需要进行水平的鉴定。

已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。在DNA连接酶的作用下构建重组质粒，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端（填“能”或“不能”）连接，理由是。

若最终转基因奶山羊乳汁中成功表达出人凝血因子Ⅳ，其中涉及的生物技术有

难度：中等题型:常考题来源：河北省邢台市2020届高三上学期生物第四次月考试卷

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9．利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。下图为基因编辑猪培育流程，请回答下列问题：

对1号猪使用处理，使其超数排卵，收集并选取处在时期的卵母细胞用于核移植。

采集2号猪的组织块，用处理获得分散的成纤维细胞，放置于37℃的CO₂培养箱中培养，其中CO₂的作用是。

为获得更多基因编辑猪，可在胚胎移植前对胚胎进行。产出的基因编辑猪的性染色体来自于号猪。

为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达，可采用的方法有（填序号）。

①DNA测序 ②染色体倍性分析

③体细胞结构分析 ④抗原—抗体杂交

难度：中等题型:真题来源：2019年高考生物真题试卷（江苏卷）

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10． B基因存在于水稻基因组中，其仅在体细胞（2n）和精子中正常表达，但在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，设计了如下实验。

据图回答：

B基因在水稻卵细胞中不转录，推测其可能的原因是卵细胞中（单选）。

从水稻体细胞或中提取总RNA，构建文库，进而获得B基因编码蛋白的序列。将该序列与Luc基因（表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光）连接成融合基因（表达的蛋白质能保留两种蛋白质各自的功能），然后构建重组表达载体。

在过程①、②转化筛选时，过程中T-DNA整合到受体细胞染色体DNA上，过程在培养基中应加入卡那霉素。

获得转基因植株过程中，以下鉴定筛选方式正确的是（多选）。

从转基因植株未成熟种子中分离出胚，观察到细胞内仅含一个染色体组，判定该胚是由未受精的卵细胞发育形成的，而一般情况下水稻卵细胞在未受精时不进行发育，由此表明。

难度：中等题型:真题来源：2019年高考理综生物真题试卷（天津卷）

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