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为制备目的基因Y(图1)与质粒X(图2)的重组DNA,将质粒X与含Y的DNA片段加入含有限制性核酸内切酶BgⅠⅡ与BamHⅠ的反应混合物中,酶切后的片段再加入含有连接酶的反应体系中.其中,质粒X含有leu2基因,可用于合成亮氨酸,目的基因Y含有卡那霉素抗性基因KanR
将连接后的产物转化入一种Z细菌,Z细菌对卡那霉素敏感,且不能在缺乏亮氨酸的培养基中培养.
材料二:T4溶菌酶在温度较高时易失去活性,科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造,使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了T4溶菌酶的耐热性.
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