万考题-全国中小学题库

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1．金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在的金属结合蛋白。某研究小组计划通过多聚酶链式反应（PCR）扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图图像，请回答下列问题：

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从高表达MT 蛋白的生物组织中提取mRNA，通过获得cDNA用于PCR扩增。

设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物（引物1和引物2），为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的限制性核酸内切酶位点。设计引物时需要避免引物之间形成，而造成引物自连。

图中步骤1代表，步骤2代表退火，步骤3代表延伸，这三个步骤组成一轮循环。

PCR扩增时，退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但的引物需要设定更高的退火温度。

如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有（填序号：①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物）。

难度：简单题型:常考题来源：天津市宝坻区2018-2019学年高二下学期生物期末考试试卷

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2．下图是基因工程的基本操作流程图，回答相关的问题。

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图中①是用切割，②是，④是，⑤是。与④相比，cDNA文库的基因中 (填“有”或“无”）启动子（具有启动作用的DNA片段），基因的数量 (填“多”、“少”或“不变”）。

PCR的原理是，需要用的酶是。PCR —般要经历三十多次循环，每次循环分为三步。利用PCR技术进行扩增目的基因的前提是。使用PCR技术，若巳知对某双链DNA扩增过程中消耗引物分子62个，则DNA扩增了次。

在“农杆菌转化法”中，运载体是质粒,但最终的受体细胞却不是大肠杆菌和酵母菌，而是不含质粒的双子叶植物和裸子植物的细胞，请问使用农杆菌的原因是。

难度：中等题型:常考题来源：河南省郑州市2018-2019学年高二下学期生物期末考试试卷

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3．如图是PCR技术扩增中，引物对与模板结合的示意图，则由一个该模板DNA片段扩增n次后，可获得2ⁿ 个子代DNA片段。下列有关叙述正确的是（）

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A: 该过程需要的原料是核糖核苷酸

B: 该过程中至少需要引物的数量是2ⁿ-2

C: 该过程需要解旋酶和热稳定DNA聚合酶

D: 两条链等长的子代DNA数量是2ⁿ-2n

难度：中等题型:常考题来源：江苏省盐城市2018-2019学年高二下学期生物期末考试试卷

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4．关于PCR技术的叙述，正确的是（）

A: PCR反应体系中需要添加解旋酶以获得单链模板

B: PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶

C: 已知基因的部分序列时也可用PCR方法进行目的基因的扩增

D: 在设计两种引物时，需要让引物和引物之间的碱基序列互补

难度：中等题型:常考题来源：北京市朝阳区2018-2019学年高二下学期生物期末考试试卷

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5． RT－PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，具体过程如图所示：

过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、、和引物A等。

过程Ⅱ首先要将反应体系的温度升高到95 ℃，其目的是、。

过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上至少需要个引物B。

利用RT－PCR技术获取的目的基因 (填“能”或“不能”)在物种之间交流；该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测，可提高检测的灵敏度，原因是。

RT－PCR过程中主要借助对的控制，影响酶的活性，从而使得化学反应有序高效地进行。

难度：困难题型:模拟题来源：江苏省盐城中学2019届高三上学期生物高考模拟试卷

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6．蓝藻兼具微生物和植物的优点，是一种独特的基因工程受体系统。很多蓝藻含有质粒，但其质粒不能直接作为运载体，需要构建成穿梭质粒表达载体，才能使目的基因在蓝藻中有效的复制和表达。回答下列问题：

据图1推测，与普通基因表达载体相比，穿梭质粒表达载体既能在中复制，也能在中复制。为了筛选转入了穿梭质粒表达载体的蓝藻，应在选择性培养基中添加。

若大肠杆菌作为受体细胞时，应选用处理使其成为感受态细胞。采用基因枪法将目的基因导人蓝藻前，可使用(填“纤维素酶和果胶酶”或“溶菌酶”或“胶原蛋白酶”)去除蓝藻的细胞壁。

已知DNA复制时，子链的延伸方向是5′→3′。使用PCR技术检测转基因蓝藻中是否存在人胸腺素基因可选择图2中1、2、3、4四种单链DNA片段中的作为引物，此过程还需要酶。

难度：中等题型:模拟题来源：山东省济南市2019届高三下学期理综生物高考模拟试卷

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7．研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞(只有一个染色体组)，成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：

注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种识别序列均不相同的限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位置：Amp^r是氨芐青霉素抗性基因，Neo^r是G418抗性基因。

利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外，还应含有；引物应选用下图中的(填图中标号)。

在基因工程操作步骤中，过程①②称为。已知氨芐青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo^r的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是(填图中编号)，③处的培养液应添加(填“氨芐青霉素”或“G418”)。

细胞乙与类似，图中桑椹胚需通过技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行处理。

难度：中等题型:模拟题来源：陕西省宝鸡市2019届高三下学期理综生物高考模拟试卷（4月）

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8． PCR是一种在生物体外扩增特定DNA片段的技术，下列关于PCR叙述正确的是（）

A: PCR技术所用的仪器是DNA合成仪

B: PCR所需的酶为热稳定DNA聚合酶和DNA连接酶

C: 循环一次要经过变性、复性、延伸三个步骤

D: PCR过程所需的两种引物是可以互补配对的

难度：中等题型:常考题来源：河北省张家口市2018-2019学年高二下学期生物3月月考试卷

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9．疟疾是经按蚊叮咬或输入带疟原虫者的血液而感染疟原虫所引起的传染病。研究发现，海参体液中含有一种能溶解人血的蛋白质X。按蚊体内含有这种蛋白质时，疟原虫会因缺乏某种营养物质而死亡。科学家据此培育抗疟原虫的按蚊。回答下列问题：

使用PCR技术体外扩增目的基因时，需要种引物；该技术的原理是。

编码蛋白质X基因与质粒构建表达载体时，所需的酶有；为了使转录在所需要的地方停下来，则需在表达载体上添加。为了便于筛选含有目的基因的细胞，需要在之间添加标记基因。

为探究改造过的按蚊是否抗疟原虫，科学家让100只分别吸食疟疾患者的血液，之后检测两组。

难度：中等题型:常考题来源：福建省厦门第一中学2018-2019学年高二下学期生物3月月考试卷

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10．酶是生命活动过程中的重要有机物，下列有关酶的叙述错误的是（）

A: 胰蛋白酶是动物细胞工程中常用的工具酶

B: RNA聚合酶、DNA连接酶和解旋酶作用的化学键相同

C: 基因工程的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶

D: PCR技术中使用耐高温的TaqDNA聚合酶扩增DNA片段

难度：中等题型:常考题来源：福建省厦门第一中学2018-2019学年高二下学期生物3月月考试卷

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