尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用．土壤中的某些微生物对尿素具有有分解作用，请就图1所示土壤中的尿素分解菌的分离与计数实验分析回答．

（1）分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄•7H₂O、KCl、H₂O．若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述 成分，并加入 物质，以补充 源．

（2）同学甲一个平板经培养后，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是 ，应当怎样操作才可避免此种现象？ ． 同学乙一个平板经培养后的菌落分布如图2所示．推测该同学接种时可能的操作失误是 

（3）四位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量．在对应稀释倍数为10⁵的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是 

A．一个平板，统计的菌落数是23

B．两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24

C．三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26

D．四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25

（4）同学丙在稀释倍数为10⁵的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL） 

（5）用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量 ，因为 ．

（6）同学丁从上图稀释10⁵倍的培养基中筛选出150个菌落，远高于其他同学的结果，如果他们测定的是同一土壤样品，则可能的原因是 ，请你通过设置对照来确定该原因 ．

回答下列关于微生物的问题．

阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深10～15cm处的土样中初筛到能降解阿拉伯胶的菌株SM01，以下为该菌株的鉴定过程．

（1）筛选所用的选择培养基只能以 作为唯一碳源，其原因是 ．

（2）SM01的菌落为粉白色，菌落初期呈突起絮状，在显微镜下观察到其菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约lμm，初步推测为真菌．下列属于SM01肯定具有的结构和特征是 （多选）．

A细胞膜  B核糖体  C拟核  D荚膜  E芽孢  F菌盖  G细胞核  H分生孢子

（3）在分离纯化菌株时，通常使用的划线工具是 ．如图1示某种划线法操作后菌落生长状况，数字表示划线顺序．某同学以同样方法对某个平板划线后，经一段时间培养，发现第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落．造成划线无菌落可能的操作失误可能是 ．

（4）为探究阿拉伯胶的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做如图2所示实验．该实验的假设是 ．为什么说该实验设计不合理？ 

（5）请根据（4）小题的分析完善其实验设计． 

（6）在阿拉伯胶降解酶运用到工业生产前，需对该酶的最佳温度范围进行测定．图3中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比．将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到的数据为酶的热稳定性数据，即图3的曲线②．据图判断下列叙述错误的是 ．

A．该酶只能在最佳温度范围内测出活性

B．曲线②35℃数据点是在80℃时测得的

C．曲线①表明80℃是该酶活性最高的温度

D．曲线②表明该酶的热稳定性在70℃之后急剧下降．

玉米（2N=20）是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油等产品．下面图甲表示玉米深加工流程，图乙表示为了获得玉米新品种常采用的一种育种方式，请回答下列问题．

（1）玉米秸秆中的纤维素在纤维素酶的作用下最终被水解成葡萄糖才能供给酵母菌利用，纤维素酶是由3种组分组成的复合酶，其中的可将纤维二糖分解成葡萄糖．纤维素分解菌能合成纤维素酶，人们常常是从土壤中分离纤维素分解菌．分离纤维素分解菌常用的方法是 ；其实验流程是：土壤取样→选择培养→→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落．

（2）使用选择培养基从土壤中分离纤维素分解菌，对培养基的要求是 ． 如果还要对土壤中该类微生物进行计数，则接种方法是 

（3）玉米胚芽油不易挥发，宜选用压榨法或法从玉米胚芽中提取．

（4）在育种过程中，若改变图乙‚过程所使用的培养基中的 ，则可能不会形成愈伤组织，而是形成胚状体．若愈伤组织没有形成根，但分化了芽，其原因可能是 ．

苯磺隆是我国北方麦田经常使用的一种除草剂，它能被土壤中某些微生物降解，从而减轻对环境的污染，如图是从土壤中分离降解苯磺隆菌株的操作流程图．

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有 四类，该实验所用的选择培养基是 ．

（2）与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加的激素有 ，这些植物激素在添加使用时，如果要达到使细胞既分裂又分化的目的，正确的做法是 ．

（3）使用接种环进行划线的目的是 ，划线的操作要求是 ．

（4）某研究小组采用透明圈法对另一种除草剂甲嘧磺隆的降解菌进行分离筛选，该透明圈是指 ，对得到的符合要求的菌株应当

研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示．

（1）柚皮易焦糊，宜采用法提取柚皮精油，新鲜的橘皮要用 浸泡处理，该过程得到的糊状液体可通过 除去其中的固体杂质．

（2）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供 ．电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度 ．

（3）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈．可通过测定透明圈的来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果．

（4）橘皮油也可用萃取法来提取，原因是 ．分析图，提高萃取效果的方法是 、 ．

下列关于应用生物技术获得生物产品的过程，请回答下列问题：

（1）酿酒时某同学尝试用罐头瓶制作果酒，在培养过程中，每隔12h左右将瓶盖拧松一次，此后再拧紧，这样做的主要目的，一是 ，二是避免氧气进入和杂菌污染．在酸性条件下，可用 来检测果酒发酵是否成功．如下图是采用纯化酵母菌培养的两种接种方法接种后培养的效果图．

判断图A所用接种方法的依据是 ，图B的接种方法是

（2）大量扩增DNA时可用PCR技术，该技术利用了DNA的 原理，通过控制 来控制双链的解聚与结合．PCR扩增得到的DNA序列长度是固定的，原因是 ．

（3）玫瑰在人们生活中具有多种用途．某同学在进行玫瑰组织培养时，可以选取生长旺盛的嫩枝做 ， 并要进行 处理．

（4）在玫瑰精油的提取实验中用（方法）提取，收集的乳浊液水油分层，需向其中加入 ． 要除去分液得到的油层中的水分，还需向其中加入无水 ．

炭疽杆菌是一类需氧芽胞杆菌，其代谢过程会将大量的代谢产物排出胞外．由炭疽杆菌引起的炭疽病是一种人畜共患、死亡率较高的急性传染病．对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过如图所示的实验确诊．请据图回答下列问题：

（1）噬菌体的主要化学成分是 ，上述实验中噬菌体与炭疽杆菌的种间关系属于 ．

（2）微生物接种的方法很多，最常用的是 ，经上述方法获得的纯种微生物如需长期保存，可采用 的方法．

（3）②是将分离培养获得的可疑菌挑选出来进行接种，此过程中对配制的液体培养基等需采取的灭菌方法是 ，该培养基所用的碳源为 （无机碳/有机碳）．

（4）在过程⑧中细菌大量繁殖，并因为 的积累而使液体培养基变浑浊．取培养后的等量菌液加入A、B试管，再将如图处理后的两试管放在35℃环境下培养6小时后观察，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组 （高或低），则证明疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除．

（1）培养基中一般含细菌生长所需的水、无机盐、 等．制备培养基时常用的灭菌方法是 灭菌．接种时使用的接种环灭菌方法是 灭菌．

（2）为分离出能够还原铀的地杆菌，可在培养基中加入  ， 从用途上看，这种培养基称为 培养基．

（3）对地杆菌计数时，常采用的方法是 法．在稀释倍数为10⁶倍下涂布了三个平板（每次取0.1mL），统计菌落数分别为240、250、260，则稀释前1mL菌液中所含细菌为 个．

（4）获取地杆菌后如要临时保存，可将其接种在 培养基上，等长成菌落后放在4℃的冰箱中保存．

答案：梯度稀释|培养