①可以用相同的培养基           ②都要使用接种针进行接种

⑧都需要在火焰旁进行接种        ④都可以用来计数活菌．

反刍动物，如牛和山羊，具有特殊的器官﹣﹣瘤胃，在瘤胃中含有多种微生物，其中许多微生物能以尿素作唯一氮源．以下示意图是从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物流程．

（1）进行①过程的目的是 ；②过程所使用的接种方法是 ．用该接种方法对微生物进行计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目 ，原因是 

（2）从用途上来说，Ⅰ号培养基属于  培养基，制备该培养基的步骤是：计算→  →灭菌→倒平板．由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌，接触空气后会死亡，因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备Ⅰ号培养基外，还要提供  的条件．

（3）酶对化学反应的催化效率称为酶活性，图示的酶活性的高低可用 中 的减少量来表示．

（4）萃取胡萝卜素的过程应避免明火加热，采用水浴加热的原因是 

（5）如果要对具有优良性状的植物进行大规模种植可采用方法，在对外植体进行接种前，需要进行制备MS 固体培养基和 两项工作．培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值  （填“高”或“低”）时，有利于芽的分化．

将醋酸菌突变体中与耐酸有关的ALDH基因导入优良醋酸菌中，选育出高发酵速率、耐酸的醋酸菌，用于果醋生产．

请分析回答下列问题：

（1）对含有ALDH基因的DNA与质粒用同种限制酶切割后，通过  酶连接形成重组质粒． 为获得耐酸的醋酸菌，用 法接种于含高浓度醋酸的培养基进行筛选．将筛选  纯化的菌种用 的方法长期保存．

（2）图1表示温度尧乙醇浓度对该醋酸菌产酸量的影响．

①醋酸菌能将乙醇转变为 ，再将其转变为醋酸．

②研究不同酒精浓度下的最高产酸量时，最好把温度控制为 ℃，如温度过高，醋酸菌代谢缓慢甚至死亡，原因是 

③酒精发酵后通过出料口检测酒精浓度，将发酵液中酒精浓度调节到  左右，才接种醋酸菌，较高的酒精浓度会使产酸量下降，不适宜接种，原因是 ．

（3）为检测发酵过程中醋酸菌数量，将1mL发酵液稀释100倍后，分别取0.1mL稀释菌液均匀 涂布在4个平板上曰经适当培养后，4个平板上的菌落数分别为24、139、140、141，据此可得出每毫升发酵液中的活菌数为 个/mL．

（1）用于培养JA122大肠杆菌的培养基中除了葡萄糖作为碳源外，还应该含有 ，要观察JA122大肠杆菌的菌落特征，则需在以上培养基中加入 ．

（2）若要对JA122大肠杆菌计数，接种方法为 ， 接种时接种工具要 后再使用．

（3）样品中共发现CV101、CV103、CV116三种新菌株，均能在以葡萄糖为碳源的培养基上生长．

①鉴定CV101、CV103、CV116是新菌株的依据是菌落  ．

②对三种菌株的代谢差异进行分析发现，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐．进一步研究表明，CV101可以在经灭菌处理后的培养过CV103的培养基中生长，据此作出的推测是： ．

③某同学设计了以下实验来验证以上推测．

第1步：配制以 为唯一碳源的培养基；

第2步：将CV101和CV103菌株分别接种到新配制的培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况．

预期实验结果及可得出的结论： ．

（1）培养微生物的培养基中一般含有微生物生长所需的水、无机盐、及生长因子等；对培养基灭菌时常用的方法是 

（2）分离及鉴定土壤中能分解尿素的细菌的原理是 ．实验中，转固体培养基时，常采用的接种方法是 ，获得单菌落后继续筛选．

（3）为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，常用的染色方法是 ．将筛选获得的菌液稀释后接种到鉴别培养基上，然后挑选产生 的菌落作为菌种进行扩大培养．从物理状态看，培养基应使用 培养基．

（4）制作果酒后制作果醋，温度变化应为由  ， 果酒制作过程中，接种酵母苗后要先向发酵罐中通﹣段时间的无苗菌空气，原因是 ．变酸的酒的表面的菌膜是 大量繁殖形成的．

如图表示从土壤中分离能降解酚类化合物﹣﹣对羟基苯甲酸的微生物的实验过程．下列与该实验相关内容的叙述正确的是（　　）

（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑 、和 等条件．

（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行 ；操作者的双手需要进行清洗和 ；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能 ．

（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的 

（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的 等菌落特征对细菌进行初步的鉴定（或分类）．

（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是 

（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过 处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散．

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基．

（2）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力  ． 通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和  ． 无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染．

（3）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即和

（1）土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自 的土壤．

（2）为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用 培养基，常用的接种方法是  ．

（3）接种后，应密封培养的原因是 ，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取 就可获得高效菌株．

（4）扩大培养过程中需要对微生物进行计数．取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220，则样品中微生物的数量为 个/mL，该统计结果 （低于、高于）实际值．

（5）在果醋制作时，运用醋酸菌在 供应和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸，请写出该过程的化学反应式： 

（6）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制．用盐腌制时，应注意控制 ；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在 %左右．

（7）制作泡菜的原理是 ．