| 构建含Barnase基因、β﹣葡糖苷酸酶基因和卡那霉素抗性基因的重组质粒,导入农杆菌,在固体培养基中培养形成以便鉴定是否混有杂菌,再用将农杆菌转移至LB培养基中进行扩大培养.构建重组质粒需要用到的工具酶是、 . |
| 将经过的幼嫩葡萄叶片切成小块,浸入农杆菌悬浮液中,4分钟后取出(此时已有较多农杆菌附着在叶片小块上)并接种到固体培养基中.培养至第3天时,可以看到在叶片小块周围出现和大量菌落.这时再用头孢霉素处理叶片小块,其目的是(A.抑制葡萄细胞脱分化 B.促进葡萄细胞再分化 C.杀灭农杆菌 D.促进农杆菌生长). |
| 将叶片小块放入卡那霉素培养基中培养一段时间后,转移至生芽培养基中,待其长出后,再转移至生根培养基中继续培养形成试管苗.卡那霉素培养基起着作用,植物克隆的技术基础是 . |
| 在卡那霉素培养基中,由于转化细胞对周围的非转化细胞有保护作用,获得的试管苗中可能存在假的转基因试管苗,因此还需对试管苗的基因的表达产物进行生化检测,才能鉴别出真正的转基因试管苗. |
| 最后,对转基因试管苗还需进行逐渐湿度的锻炼,使之适应自然环境. |