万考题-全国中小学题库

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1． Bt基因即苏云金芽孢杆菌(Badcillus thuringiensis，简称Bt)基因，因其表达产物Bt毒蛋白杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的转杀虫基因。如图为培育转Bt基因苗的基本操作过程。

Bt基因可从构建的Bt基因组文库中获取，也可以从其cDNA文库中获取，从前者获取的基因（填“含有”或“不含有”）启动子。若利用PCR技术扩增Bt基因，此过程中Taq酶所起的作用是。

步骤IV中产生的细胞团称为，步骤IV和V过程要注意控制培养基中的浓度比例，以便获得幼苗。

我国西北的一些地区年降雨量很小，只适宜种植少数的草本植物，但却被硬性规定种植转Bt基因的植物，结果造成减产。这个案例主要违背了生态工程的原理。

蛋白质工程也被称为，其基本途径是从出发，通过设计预期的蛋白质结构和推测应有的氨基酸序列，进而找到相对应的，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物功能进行鉴定。

难度：中等题型:模拟题来源：江西省五市八校2018届高三下学期生物第二次联考试卷

2．现代生物技术

海洋石油污染正引起广泛关注，利用基因工程菌进行生物降解具有巨大的应用潜力。P450是石油降解的关键酶，用SalI和NdeⅠ联合酶切获得的P450基因，与甲图所示的质粒（pCom8）重组，导入土著菌种Y9，获得了基因工程菌P450/Y9。甲图中mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的菌落变成黑色，aacCl是庆大霉素（一种抗生素）抗性基因，限制酶NdeⅠ、XhoⅠ和SspⅠ在原质粒上均只有一个酶切位点，数字表示酶切位点间的碱基对数。乙图表示几种限制酶的识别序列和切割位点。

上述基因工程中的受体细胞是。

原质粒需用限制酶作用后，才能与在DNA连接酶的作用下形成重组质粒。

经测定原质粒为7.6kb（1kb为1000个碱基对），重组质粒经NdeⅠ、SspⅠ联合酶切后获得了6.0和1.2kb的两个片段，则目的基因的长度为kb。

由于重组质粒导入受体细胞的成功率很低，所以需要经过才能获得工程菌。操作的大致思路是：

第一步，配制培养基。除下表中的成分外，还必须添加和。

第二步，晶待检菌液用法接种在第一步配制的培养基上。

第三步，选择色菌落扩大培养即可获得所需的工程菌。


蛋白胨	酵母浸膏	NaCl	KCl	MgCl2	H₂O	pH
20.0 g	5.0 g	0.5 g	0.2 g	1.0 g	1000 mL	7.0

为检测基因工程菌降解石油的能力，科研人员做了如下4组实验，测定不同时间各组的石油降解率，实验结果见图。

A组：单独使用Y9

B组：单独使用P450/Y9

C组：联合使用Y9、W3、F9、X1四种菌种

D组：联合使用P450/Y9、W3、F9、X1四种菌种

据图分析以下说法正确的是________（多选）。

难度：中等题型:模拟题来源：上海市静安区2018届高三生物高考二模试卷

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3．回答有关现代生物技术应用的问题。

乳糖不耐受是由于乳糖酶（LCT)分泌少，不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的非感染性腹泻。我国利用生物技术培育出转基因低乳糖奶牛新品种，给患乳糖不耐症患者带来福音。上图为转基因低乳糖奶牛培育流程。下图是使用限制酶BamHⅠ切开DNA产生的结果。

图中的牛胎儿成纤维细胞无法直接发育成个体，需要去核卵母细胞的细胞质诱导才能实现。

据图分析，BamHⅠ的识别序列以及切割位点（用“↓”表示）是。

图中质粒S用BamHⅠ和HindⅢ联合酶切后形成1.8kb和8.2kb(1kb=1000对碱基)两种片段，若用BamHⅠ和EcoRⅠ联合酶切重组质粒T，获得1.6kb和8.8kb两种片段，则转入的LCT基因长度为kb。

分析图，成功导入质粒T的牛胎儿成纤维细胞与转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中的化合物，在表中用“√”表示存在，用“×”表示不存在。

化合物	牛胎儿成纤维细胞	转基因低乳糖奶牛乳腺细胞
LCT基因
LCTmRNA
LCT

培育转基因奶牛涉及的生物技术有(写出两种）。

难度：中等题型:模拟题来源：上海市虹口区2018届高三生物高考二模试卷

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4．现代生物科技日新月异，请据图回答：

图中的PrG、生长激素基因都是目的基因，可从基因文库或cDNA文库获得后，常用技术扩增。扩增后，如何鉴定其化学本质，请简要写出实验设计思路。。

获得转生长激素基因牛的核心步骤是，过程通常用法把目的基因导入受精卵；过程③若要得到两头基因型一样的牛，可在阶段采用胚胎分割技术获得。

将PrG导入浆细胞制备单克隆抗体，应进行多次专一性抗体检测，Ⅰ到Ⅱ间检测筛选的目的是。

简述⑤的培养流程。。

难度：中等题型:模拟题来源：广东省茂名市2018届高三第一次综合考试理综生物试卷

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5．基因表达载体的构建是基因工程的重要技术。下图甲表示以大肠杆菌为受体细胞的基因表达载体的构建过程，请回答以下问题：

质粒中的复制原点是酶识别和结合的位点。

为了筛选获得含有上图所示重组质粒的大肠杆菌，实验人员首先将经转化处理过的大肠杆菌接种在含（抗生素）的培养基中，并出现菌落（图乙），然后用灭菌后的丝绒包上棉花制成的一枚“印章”，将图乙所示培养基上的菌落印到含（抗生素）的另一培养基上，培养后形成菌落（图丙）。图丙中，（填“能正常生长繁殖”或“不能正常生长繁殖”）的菌落已导入含目的基因的重组质粒。

基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体。噬菌体载体与质粒载体相比,其优点是。

1967年，罗思和海林斯基发现细菌染色体DNA之外的质粒有自我复制能力，并可以在细菌细胞之间转移，这一发现对于当时基因工程技术的发展有什么促进作用？

若某DNA分子片段用两种限制酶酶切成不同长度的片段（结果如下表所示）。

酶	酶切结果（1kb=1000对碱基）
BamHI	四个片段：8.0kb，7.5kb，4.5kb，2.9kb
BglII	三个片段：13kb，6kb，3.9kb
BamHI+ BglII	六个片段：7.5kb，6kb，3.5kb，2.9kb，2kb，1kb

7.5kb、2.9kb和6kb三个片段中不存在BamHI和BglII两种酶的酶切位点，请根据上述酶切结果说明判断依据：。

难度：困难题型:模拟题来源：广东省揭阳市2018届三生物高考一模试卷

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6．请分析回答下列关于培育转基因小鼠的问题。

PCR技术利用了原理解决了打开DNA双链的问题，从一种Taq细菌中分离到，解决了DNA聚合酶失活的新问题。

利用PCR技术从基因文库中提取目的基因时，首先要根据目的基因的核苷酸序列设计并合成出。在第轮开始出现目的基因片段。

获取小鼠受精卵时，将雌鼠注射促性腺激素的目的是。然后从雌鼠中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是。

将外源基因导入小鼠受精卵后，外源基因会随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因。

难度：中等题型:模拟题来源：河南省豫南六市2018届高三生物高考一模试卷

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7．科技人员利用基因工程、胚胎工程等将哺乳动物转变成“批量生产药物的工厂”。下图为利用奶牛生产抗病毒的特效药—干扰素的基本流程。请回答：

由干扰素mRNA形成cDNA的①过程称作。②过程获得大量干扰素基因的方法有、PCR技术扩增和人工合成。③过程中用到的“工具酶”有。④过程中采用最多最为有效的方法为。

形成受精卵的⑤过程主要包括精子穿越放射冠和透明带，进入卵细胞膜，。在这个过程中，防止多精子入卵受精的屏障有。

⑥过程中由受精卵形成的“早期胚胎”为，该胚胎可用于⑦过程.也可放入中保存。

若转基因牛的体细胞中只携带了一个干扰素基因，常采用的方法来培育出体细胞中含有两个干扰素基因的纯合个体。

难度：中等题型:模拟题来源：河南省八市学评2018届高三下学期生物高考一模试卷

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8．【加试题】回答下列Ι、Ⅱ两道小题：

腐乳是中国流传数千年的传统民间美食，通常分为青方、红方、糟方三大类。请结合相关知识回答问题：

①在制作腐乳过程中，所需的微生物来源于；而现代的腐乳生产是在条件下，将优良的菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染。腐乳在酿造后期发酵中添加适量酒液的目的是(答出一点即可）。

②科学家研究了食盐用量对豆腐乳品质及发酵周期的影响，结果如图：

由图可知，随食盐用量的增加，豆腐乳品质的综合评分总体上呈现趋势，选择食盐用量为较为适宜。发酵周期与食盐的用量呈相关，原因可能是。

研究表明，油菜中蛋白质与油脂均由丙酮酸转化而来，丙酮酸羧化酶（PEP）能催化丙酮酸合成蛋白质。下表中甲株为正常油菜，乙、丙和丁株为转反义PEP基因的油菜。请回答：

组别	油脂含量（%）	蛋白质含量（%）
甲	40.02	24.12
乙	49.42	22.24
丙	48.69	22.50
丁	47.60	22.52

①利用PCR获取PEP基因时，根据PEP基因上游及下游的碱基序列，设计并人工合成，PCR的原料是。

②在构建PEP基因表达载体时，如果将PEP基因反向连接在和终止子之间，可构成反义PEP基因表达载体。若PEP基因在转录时，两条单链（a链、b链）中的a链为模板链，则反义PEP基因在转录时的模板链为。

③在检测反义PEP基因是否整合到油菜细胞的染色体DNA上时，拟用PEP基因做探针，该方案是否可行？请说明理由。。

④分析上表数据，乙、丙和丁三株油菜细胞中与蛋白质合成相关的基因有，反义PEP基因提高油脂含量的原理是。

难度：中等题型:模拟题来源：浙江省普通高校2018届招生选考科目考试生物仿真模拟试卷

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9．科学家运用基因工程技术将结核杆菌MPT64基因（能控制合成MPT64蛋白）成功导入胡萝卜细胞，最终表达出肺结核疫苗。回答下列问题：

为获取MPT64基因，可从结核杆菌的细胞中提取对应mRNA，在的作用下合成双链cDNA片段，该cDNA片段(填“可以”、“部分可以”或“不可以”）实现物种间的基因交流。

通常采用PCR技术扩增MPT64基因，前提是要有一段已知MPT64基因的核苷酸序列，原因是，在操作步骤中需要加热至90～95℃的目的是。

根据农杆菌的特点，如果将MPT64基因插入上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入胡萝卜细胞，并将其插入植物细胞中的上。要确认MPT64基因是否在胡萝卜植株中表达，应检测胡萝卜植株中是否含有。

科学家探知，若能把MPT64蛋白第20位和第24位的氨基酸都改变为半胱氨酸，可以更好保证所生产的肺结核疫苗分子的稳定性。根据蛋白质工程的原理，可对进行修饰或改造，以达到生产目的。

难度：中等题型:模拟题来源：广西南宁市2018届高三生物高考一模试卷

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10． htPA是一种重要的药用蛋白，可通过转基因技术在羊乳中获得。流程如下：

质粒的化学本质是。基因工程中的基本操作中，唯一没有发生碱基配对的步骤是。

在操作中要对供体母羊注射进行超数排卵处理；并将采集到卵母细胞在体外培养到期才具备与精子受精的能力。胚胎移植能否成功，与供受体的生理状况有关。为胚胎在代孕母羊内的存活提供了可能。

继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以和成人的生长激素并分配到药液中，请你列出膀胱生物发生器比乳腺生物反应器优点（至少列出两个优点）：。

难度：中等题型:模拟题来源：广西桂林市、百色市、崇左市2018届高三第三次联合模拟考试生物试卷

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