Ⅰ.玉米秸秆中的主要成分是纤维素，预处理包括粉碎、酶解等过程，使之转化为发酵所需的。

Ⅱ.从以下哪些微生物中可以提取上述预处理所需的酶？

A．醋杆菌    B．黑曲霉    C．乳酸菌    D．酵母菌

Ⅲ.若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的选择培养基中的碳源为，配制好的培养基要用法灭菌，为了更好地分离并进行活菌计数，可以采用的接种方法是。

Ⅳ.酒精发酵阶段需要的菌种属于（填“原核生物”或“真核生物”），在产生酒精时要控制的必要条件是。

Ⅰ.如果想利用转基因猪生产用于移植的心脏等器官，目的基因是人的 MHC 基因，并且已知该基因的碱基序列，可以用方法获得该基因并扩增，然后将目的基因与质粒等载体结合形成了重组质粒。在重组质粒的构建过程中需要的工具酶有。 在这个操作过程中受体细胞应选用猪的（A．胚胎干细胞     B．T 淋巴细胞    C．B 淋巴细胞  D．心肌细胞）。培养该受体细胞时，一般要在培养皿底部制备一层胚胎成纤 维细胞，目的是。

Ⅱ.从苏云金芽孢杆菌中获得的毒蛋白基因与 Ti 质粒重组，之后需要先使重组 Ti 质粒进入细 胞，为了增加转化效率，需要用 处理该细胞，以增加其细胞壁的通透性，筛选后利用该细胞对植物细胞的侵染能力使目的基因进入植物细胞并表达，从个体水平鉴定烟草是否获得抗虫能力的方法是。

①获取的外植体首先要通过过程培养出愈伤组织。研究发现三七幼茎、幼嫩花蕾等作为外植体诱导形成愈伤组织的成功率较高，这可能因为。

②将愈伤组织接种到发酵罐中进行细胞培养提取皂苷的过程（填“体现”或“未体现”）细胞全能性。在长期细胞培养中，愈伤组织细胞的器官形成能力会发生不可逆的下降，原因有染色体畸变、细胞核变异或等，因此需要定期培育新的愈伤组织来维持生产的可持续性。

①可通过方法扩增目的基因M，然后将其构建至VIGS载体，侵染三七植株。检测被侵染植株基因M的表达量，选择表达量的植株，观察其与对照组的表型差异。若沉默植株出现果实成熟延迟的现象，推测基因M可能与植物激素的合成有关。

②若要进一步验证基因M的功能，可将其构建至其他表达载体中并在新的植株中过量表达。若其确有前述功能，则新的转基因植株可能出现的表型。

注：Cef（头孢霉素），Carb（羧苄青霉索）