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部编版： 必修1《分子与细胞》
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  • 1． 人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠(2N)制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示(注：基因B为高血压相关基因)。

    进行①过程的卵母细胞应处于期，此时细胞中含个染色体组。受精过程中防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和。

    ②过程所采用的技术叫做法。将早期胚胎移植到代孕鼠体内时，代孕鼠对移入子宫的重组胚胎基本上不发生，这为重组胚胎在代孕母鼠体内的存活提供了可能。

    目的基因能否在大鼠体内稳定遗传的关键是，可以用技术进行检测。
    难度： 中等 题型:常考题 来源：广东省揭阳普宁市普师高中校2022届高三上学期生物第一次阶段考试试卷
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  • 2． 玉米是二倍体。某科研人员将BT毒蛋白基因导入玉米细胞，培育转基因抗虫玉米，实验流程图如下，EcoRI、SmaI、BamHI为限制酶（箭头所指为酶切位点）。回答下列问题：

    过程①中，为使BT毒蛋白基因与质粒定向拼接，应选用（填限制酶名称）切割BT毒蛋白基因与质粒。图中质粒没有标明的结构是标记基因，该结构的作用是。
    过程②常用法将重组质粒导入愈伤组织，该方法能够将BT毒蛋白基因整合到愈伤组织的染色体DNA中，与之有关的物质是。
    过程③表示，过程④表示，玉米苗1与玉米苗2体细胞中染色体组数的关系是。
    难度： 中等 题型:常考题 来源：山西省运城市2021-2022学年高三上学期生物入学摸底测试试卷
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  • 3． 如图为纯种荷斯坦小奶牛的繁殖过程，请回答下列问题：

    为让供体母牛进行超数排卵，需要给母牛注射。从供体母牛采集的卵母细胞都需要进行体外培养，其目的是。从优秀种公牛采集的精子需后才能进行受精作用。
    胚胎在早期培养时，培养液中除含有无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及等物质。如需对初期胚胎进行性别鉴定，宜取囊胚期的细胞进行鉴定。
    早期胚胎发育到阶段才可以移植，在移植之前，需要进行质量检查，用某染料（该染料分子不能通过细胞膜）鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是。
    如果培育转基因荷斯坦奶牛，可采用技术将药用蛋白基因导入到中。在检测受体细胞的染色体DNA上是否插入了目的基因时，常采用的方法是技术，根据是否显示出杂交带进行判断。
    难度： 中等 题型:常考题 来源：广东省2022届高三生物9月开学摸底联考试卷
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  • 4． CRISPR/Cas9是一种高效的基因编辑技术，Cas9基因表达的Cas9蛋白像一把“分子剪刀”，在单链向导RNA（SgRNA）引导下，切割DNA双链以敲除目标基因或插入新的基因。CRISPR/Cas9基因编辑技术的工作原理如图所示。

    回答下列问题。
    过程①中，为构建CRISPR/Cas9重组质粒，需对含有特定sgRNA编码序列的DNA进行酶切处理，然后将其插入到经相同酶切处理过的质粒上，插入时所需要的酶是。
    过程②中，将重组质粒导入大肠杆菌细胞的方法是。
    过程③~⑤中，SgRNA与Cas9蛋白形成复合体，该复合体中的SgRNA可识别并与目标DNA序列特异性结合，二者结合所遵循的原则是。随后，Cas9蛋白可切割序列。
    利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除一个长度为1200bp的基因，在DNA水平上判断基因敲除是否成功所采用的方法是，基因敲除成功的判断依据是。
    某种蛋白酶可高效降解羽毛中的角蛋白。科研人员将该蛋白酶基因插入到CRISPR/Cas9质粒中获得重组质粒，随后将其导入到大肠杆菌细胞，通过基因编辑把该蛋白酶基因插入到基因组DNA中，构建得到能大量分泌该蛋白酶的工程菌。据图简述CRISPR/Cas9重组质粒在受体细胞内，将该蛋白酶基因插入到基因组DNA的编辑过程：。
    难度： 中等 题型:真题 来源：2021年高考生物真题试卷（海南卷）
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  • 5． 已知生物体内有一种蛋白质（P），该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质（P1）不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。
    利用PCR技术扩增目的基因时知道基因的全部序列。在PCR体系中除了模板、原料外，还应加入。
    蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过和，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物功能进行鉴定。
    “CRISPR/Cas9”技术是目前常用改造DNA序列的一种方法，下图为向导RNA引导Cas9蛋白切割目标DNA示意图。其中Cas9蛋白是一种酶。Cas9蛋白和特定的向导引导序列可利用法导入到动物受精卵或干细胞中发挥基因编辑作用。

    经改造后的细胞，若想工业化大量制备蛋白质P1 ， 可利用和技术将改造细胞转化为即可产生P1又能无限增殖的细胞，最后自培养液中可得到目的蛋白质。
    难度： 中等 题型:常考题 来源：湘豫名校联考2021-2022学年高三上学期生物8月考试试卷
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  • 6． 下图1中的三个DNA片段上依次表示出了EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ和Sau3A Ⅰ三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图2为某种基因表达载体的示意图（载体上的EcoR Ⅰ、Sau3A Ⅰ的切点是唯一的）。请回答下列问题：

    经BamH Ⅰ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被酶切后的产物连接，理由是。
    图2中启动子的作用是，终止子的作用是，抗生素抗性基因的作用是。
    构建基因表达载体时，还需要用到DNA连接酶。常见的DNA连接酶有DNA连接酶和DNA连接酶，其中能连接平末端的是DNA连接酶。
    若某人利用图2所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子（如下图）。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有，原因是。

    难度： 困难 题型:模拟题 来源：江苏省南通市如皋市2022届生物第一次调研考试试卷
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  • 7． 菊花是一种双子叶植物，易感桃蚜。桃蚜不但直接影响植物生长，还是多种植物病毒的传播媒介。雪花莲凝集素基因GNA的表达产物能有效抑制桃蚜生长。某科研团队运用农杆菌转化法获得了转GNA基因菊花。下列有关叙述正确的是（   ）
    A: 受体细胞可以选择菊花叶片细胞或桃蚜细胞
    B: 将目的基因GNA插入到Ti质粒的T-DNA上构建表达载体
    C: 菊花外植体产生的酚类化合物能吸引农杆菌移向受体细胞
    D: 应用抗虫接种实验，检测转基因菊花对桃蚜的抗性及抗性的程度
    难度： 中等 题型:模拟题 来源：江苏省南通市如皋市2022届生物第一次调研考试试卷
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  • 8． 植物基因工程可以改造农作物性状，使农作物变得更加高产。如图是培育良种水稻的有关原理和步骤，有关叙述错误的是（   ）
    A: 图中表达载体中的T-DNA插入外源基因后将失去作用
    B: 图中②过程需要在无菌环境下用Ca2+处理土壤农杆菌
    C: 需要用除草剂检测转基因植株是否具有抗除草剂性状
    D: 该过程需要用到固体和液体培养基
    难度： 中等 题型:常考题 来源：浙江省“山水联盟”2021-2022学年高三上学期生物开学试卷
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  • 9． 杨树被根瘤农杆菌感染后会增生并长出瘤状物，称为冠瘿，冠瘿内的冠瘿碱是一种含氮有机物，是根瘤农杆菌生存的唯一碳源和氮源。冠瘿的形成是由于根瘤农杆菌携带有天然的Ti质粒，其结构如图所示。下列说法错误的是（   ）
    A: Ti质粒上的生长素基因可在杨树生长发育过程中发挥作用
    B: Ti质粒上的T-DNA区域，至少含有一个限制酶的酶切位点
    C: 冠瘿碱合成基因在根瘤农杆菌细胞中表达并分泌到细胞外
    D: 根瘤农杆菌内Ti质粒的存在，决定了其冠瘿碱代谢基因侵染植物的范围
    难度： 中等 题型:常考题 来源：山东省青岛市2021-2022学年高三上学期期生物开学试卷
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  • 10． 镰孢菌引起的小麦赤霉病被称为小麦“游症”，是威胁粮食安全的重大国际性难题。我国科学家从小麦近缘属植物长穗偃麦草中首次克隆出主效抗赤霉病基因Fhb7（编码一种谷胱甘肽S-转移酶），为解决小麦赤霉病的世界性难题提供了“金钥匙”。研究发现，用光诱导型启动子（PrbcS）能够使Fhb7基因表达，其结合T基因后能使Fhb7基因更高水平表达。
    PrbcS是一段有特殊结构的DNA片段，能被识别并结合，驱动基因的持续。
    通过PCR技术扩增Fhb7基因片段，反应过程一般由95℃热变性、55～60℃引物和模板配对、72℃延伸三个步骤，经过多次循环完成。延伸阶段选用72℃综合考虑了两个因素，这两个因素是和，若研究人员在反应缓冲溶液中加入4种dNTP时，误加入了单一种类的ddNTP（即2、3双脱氧核苷三磷酸，在脱氧核糖的3位置缺少一个羧基），则子链会停止延伸，分析其原因是。
    下图中甲、乙均为Fhb7基因表达载体构建过程中的中间载体，请分析重组载体的部分构建过程。

    （注：Kmr为卡那霉素抗性基因，origin为复制原点，其余为限制酶酶切位点）

    区别含有中间载体甲-PrbcS-*T与含有重组载体乙-PrbcS-*T的微生物的方法是。经酶切后凝胶电泳，测得2B片段为0.3kb，经图示信息分析，PrbcS-T的长度约为。据图分析，形成重组载体乙-PrbcS-*T，需要使用限制酶切割，图中重组载体乙-PrbcS-*T问号处有种限制酶的酶切位点。
    难度： 中等 题型:常考题 来源：山东省青岛市2021-2022学年高三上学期期生物开学试卷
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