万考题-全国中小学题库

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年份	全部 2022 2021 2020 2019 2018 更早

1．凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。直接利用动、植物生产凝乳酶受多种因素限制，培育高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向。从牛胃液中分离到的凝乳酶以催化能力强而被广泛应用，研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中。

从牛胃细胞中提取，再逆转录形成 cDNA，以此 cDNA 为模板 PCR 扩增目的基因，有时需要在引物的5’端设计（填“限制酶”“DNA 连接酶”或“RNA 聚合酶”）识别序列，以便构建重组 DNA 分子。

构建重组 DNA 分子（如图 1 所示）最好选用限制酶，理由是。若研究人员获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组质粒，如图 2 所示。这三种重组质粒中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有，不能表达的原因是。

工业化生产过程中，最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶，现多采用重组毛霉生产，相较于大肠杆菌，毛霉作为受体细胞的优势是。

研究发现，如果将该凝乳酶的第 20 位和第 24 位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2 倍。通过蛋白质工程生产高效凝乳酶，所需步骤有。

a．蛋白质的结构设计 b．蛋白质的结构和功能分析 c．蛋白质结构的定向改造d．凝乳酶基因的定向改造 e．将改造后的凝乳酶基因导入受体细胞f．将定向改造的凝乳酶导入受体细胞

难度：中等题型:常考题来源：黑龙江省哈尔滨市九中2021-2022学年高三下学期开学考试理综生物试卷

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2．已知新冠病毒的S抗原基因编码的S蛋白在感染人体细胞的过程中起到关键作用，S蛋白与人细胞膜上ACE2受体结合后，新冠病毒入侵人体细胞。我国陈薇院士团队成功开发了一种以人复制缺陷腺病毒为载体的重组新型冠状病毒基因疫苗，目前已获批上市。回答下列问题：

制备腺病毒载体新冠疫苗时，首先需在的作用下，以新冠病毒的遗传物质RNA为模板经过逆转录得到S抗原基因后，利用PCR技术扩增S抗原基因的体系中需加入酶。

腺病毒DNA上有，便于S抗原基因插入，S抗原基因整合进腺病毒基因组时，需将S抗原基因插在腺病毒载体的启动子和终止子之间，使S抗原基因能，从而激发人体产生抵抗新冠病毒的抗体和记忆细胞。

研究人员还可将S蛋白注入动物体内，一段时间后从其脾脏中获取浆细胞，与骨髓瘤细胞融合，并利用选择培养基筛选出的杂交瘤细胞。接着经过多次筛选并在体外培养，获得针对S蛋白的单克隆抗体，该单克隆抗体最主要优点是。

将新冠病毒灭活制成的灭活疫苗对预防新冠肺炎也有很好的效果，这种疫苗免疫程序是两针免疫，接种间隔为3-8周，间隔时间过长、过短都可能影响免疫预防的效果，原因可能是。

难度：中等题型:常考题来源：江西省重点中学协作体2021-2022学年高三2月第一次联考理综生物

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3．近年来油菜是世界农产品贸易中发展极为迅速的一类产品，油菜籽已成为一种世界性重要油料，其蛋白质和油脂的相对含量与下图甲过程有关，研究发现转录时酶1基因的模板链会与某种基因（基因A）的模板链互补，人们通过生物工程技术对油菜进行改造，以得到含有基因A的油菜，流程如图乙所示。回答下列问题：

通过从、利用PCR技术扩增或人工化学合成等方法，都可获取目的基因A。基因工程的核心步骤是，图中过程②使用的方法是。

在进行过程①时，可以向培养基添加，以筛选获得含重组质粒的农杆菌。基因A需插入到植物细胞染色体的DNA上，理由是。常用技术，检测得到的转基因油菜的染色体DNA上是否插入了基因A。

与普通油菜相比，含基因A的油菜籽粒油脂含量显著提高，其机理可能是基因A转录的mRNA与酶1基因转录的mRNA互补，从而阻碍了过程，降低了酶1含量，使更多的丙酮酸转化为油脂。

难度：中等题型:常考题来源：湖北省新高考联考协作体2021-2022学年高三2月联考生物

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4．下列是生物技术制备抗体的两个途径模式图。回答下列问题：

在获取抗体之前，需要向健康人体注射特定抗原（如乙肝疫苗），并且每隔一周重复注射一次。免疫学细胞A在人体主要参与免疫。

过程①→②抗体的获取称为，其中①是过程。

④过程需要酶，⑤过程则需要特定的限制酶和DNA连接酶。

抗体1与抗体2相同之处是，不同之处在。

如果想用棉花产生该种抗体，则⑥过程的受体细胞通常选用，经过筛选后再侵染棉花体细胞，转化成功后通过技术获得能产抗体的转基因棉花植株。

难度：中等题型:常考题来源：吉林省长春市十一中2021-2022学年高三上学期第二学程考试生物试卷

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5．在菲律宾首都马尼拉郊外的一片稻田里，一种被称为“金色大米”的转基因水稻已经悄然收获。这种转基因大米可以帮助人们补充每天必需的维生素A。由于含有可以生成维生素A的β-胡萝卜素，它呈现金黄色泽，故称“金色大米”。“金色大米”的培育流程如图所示，请回答下列问题。（已知酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—）

培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是，通过该操作形成了图中的（填字母），它的构成至少包括等。

在构建c的过程中目的基因用（填“限制酶Ⅰ”或“限制酶Ⅱ”）进行了切割。检验重组载体导入能否成功，需要利用作为标记基因。

过程d通常采用法，过程e运用了技术，在该技术应用的过程中，关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行。

若希望该转基因水稻生产的“金色大米”含维生素A含量更高、效果更好，则需要通过工程手段对合成维生素A的相关目的基因进行设计。该工程是一项难度很大的工程，目前成功的例子不多，主要原因是。

难度：中等题型:常考题来源：黑龙江省大兴安岭实验中学2021-2022学年高三上学期期末生物试卷

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6．研究发现，2018-2030年糖尿病患者的胰岛素用量可能会增加20%，目前的胰岛素产量不能满足全球需求，利用生物工程生产人胰岛素是解决该问题的主要手段。已知人胰岛素基因中含有不能编码蛋白质的内含子，转录形成的mRNA需加工（切去内含子对应区段）后才可翻译；而大肠杆菌的基因中没有内含子，也没有切除内含子相应的机制。如图是利用基因工程生产人胰岛素的操作示意图。回答下列问题：

科研人员利用步骤①②获得人胰岛素基因，而不是从人的基因组文库中获得，原因是。

通过步骤⑤可以短时间内获得大量的胰岛素基因，它利用的原理是。利用该技术扩增胰岛素基因的条件有胰岛素基因，dATP、dCTP、dTTP、dGTP、酶和引物等，其中合成引物的前提条件是要有。

步骤是基因工程的核心步骤，其目的是。为确定步骤⑩获得的人胰岛素的功能活性是否与天然产品相同，科研人员还需进行的研究是。

科学家利用蛋白质工程技术，研制出了赖脯胰岛素，与天然胰岛素相比，其皮下注射后易吸收，起效快。获得赖脯胰岛素基因的途径是：从预期的蛋白质功能出发→→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。

难度：中等题型:常考题来源：河北省邯郸市2021-2022学年高三上学期期末生物试卷

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7．新型肺炎的病原体——新冠病毒，结构如图所示（棘突、脂质膜、包膜成分都是含有蛋白质，它们分别是由病毒RNA的基因S、M、E的指导合成）。根据相关知识回答下列问题：

新冠病毒侵染过程中，棘突首先与细胞膜上受体结合，可能作为病毒的疫苗。如果利用基因工程研制新冠病毒疫苗，第一步是得到基因S，以用于后续操作，请简述获取S基因过程。基因工程的核心步骤是，完成该步骤所需要的酶有。

制备出来的“产品”要作为疫苗来使用，必须具备的条件有两个：。

检测新型肺炎的一般策略是检测疑似病例是否携带新冠病毒。新冠病毒主要由核酸和蛋白质构成，如果检测核酸，一般的方法是；如果检测其特异性蛋白，方法是。

难度：中等题型:常考题来源：广东省东莞市七校2021-2022学年高三上学期生物12月联考试卷

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8．经过基因工程改造的、能生产人胰岛素的大肠杆菌是一种特殊的“工程菌”。所用运载体（普通质粒）结构如下图左，目的基因如下图右。

该过程中最重要的环节是基因表达载体的构建，方法是选用（用“X／Y”作答）限制酶同时处理质粒和目的基因，再用处理使之成为重组质粒。

将上述重组质粒导入大肠杆菌前，应用处理细胞，目的是。

将目的基因导入受体菌时，常出现三种情况：未转化的细菌、含空载体（普通质粒）的细菌、含重组质粒的细菌。下图是含人胰岛素目的基因的重组质粒的“工程菌”的筛选示意图：

上图中的和（选用“A／B／C／D／E”字母作答）菌落为含有目的基因的“工程菌”。

难度：中等题型:常考题来源：广东省汕头市澄海中学2021-2022学年高三上学期生物第二学段考试试卷

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9． DNA分子杂交技术可以用来比较不同种生物DNA分子的差异。当两种生物的DNA分子有互补的碱基序列时，碱基的互补的区段会形成杂合双链区（如图所示）。下列叙述错误的是（）

A: 可利用该技术从基因文库中筛选目的基因

B: 杂合双链区不一定含有完整的遗传信息单位

C: 杂交游离区的形成是因为该区域碱基的序列不同

D: 杂合双链区的形成过程中有氢键及磷酸二酯键的生成

难度：中等题型:常考题来源：浙江省金华十校2021-2022学年高三上学期生物11月月考试卷

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10．研究人员将新霉素抗性基因（Neo^r）和绿色荧光蛋白（GFP）基因的双标记选择载体导入胎牛输卵管上皮细胞，获得转基因细胞株，并以转基因细胞为核供体，获得转基因牛。下列相关叙述正确的是（）

A: Neo^r基因和GFP基因的连接不需要限制性核酸内切酶

B: 转基因细胞株的培养液中含新霉素、葡萄糖、氨基酸、激素等物质

C: 核移植前应增加转基因细胞培养液中的血清浓度以提高动物克隆成功率

D: 观察早期胚胎的荧光筛选胚胎进行移植，移植时不能移植多个胚胎

难度：中等题型:常考题来源：浙江省Z20联盟（名校新高考研究联盟）2021-2022学年高三上学期第二次联考生物试题

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