万考题-全国中小学题库

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1．细胞色素P450酶在菇类天然产物合成过程中起重要（羟基化）作用，自然条件下，P450酶与其伴侣蛋白CPR（为P450酶传递电子）在细胞内分别表达，催化效率较低。研究人员推测，若将P450酶与CPR通过一段linker（3-9个氨基酸组成的柔性肽链）融合表达成一个蛋白（如图），催化效率会有不同程度提高。请回答：

首先从预期融合蛋白的功能出发，设计融合蛋白的结构，推测其设计并合成相应的。融合蛋白的表达顺序为CPR-linkerP450，设计时应将CPR基因的删除，保证融合基因连续表达。

欲进一步探究linker长度对P450酶催化效率的影响，基本实验思路：，本实验还应设置的对照组是

PCR技术扩增融合蛋白基因时，所遵循的原理是，将模板DNA加热至90-95℃的目的是.

难度：中等题型:模拟题来源：吉林省长春市2019年高三理综生物高考一模试卷

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2．地中海贫血症在我国南方发病率很高。临床上，可以通过从胎儿血液中提取、分离红细胞中的血红蛋白，采用技术手段进行鉴定，从而为胎儿地中海贫血的确诊提供实验证明，请回答下列问题：

采集的血样要及时分离红细胞，分离时采用离心，将离心后的下层红细胞液体倒入烧杯中，加入五倍体积的进行洗涤。

将洗涤后的红细胞倒入烧杯后，加入和，使红细胞破裂释放出血红蛋白，经搅拌、离心、分层后获得血红蛋白溶液。随后将血红蛋白溶液装入透析袋透析12小时，其目的是，完成血红蛋白粗分离。

粗分离的血红蛋白溶液中含有一些微蛋白（如下图，表示甲～戊五种蛋白质的分子量及电荷量，且五种蛋白质均只由一条肽链构成），若用凝胶色谱法进行血红蛋白的纯化，则图中移动最慢的是蛋白（填编号）。若将样品进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，则移动速度最慢的是蛋白（填编号），判断理由是。

难度：困难题型:常考题来源：河南省三门峡市2021-2022学年度高二下学期生物期末考试试卷

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3．某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中初步提取血红蛋白，设计的“血红蛋白提取、分离流程图”如下：

请回答下列有关问题：

样品处理中红细胞的洗涤要用反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH＝7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是。

血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是，若要尽快达到理想的透析效果，可以（写出一种方法）。

电泳利用了待分离样品中各种分子的等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。

一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如图所示。由图可知携带者有种血红蛋白，从分子遗传学的角度作出的解释是。

难度：中等题型:常考题来源：河南省郑州市十校2021-2022学年高二下学期期中联考生物试卷

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4．在装填凝胶色谱柱时，不得有气泡存在的原因是（）

A: 气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果

B: 气泡阻碍蛋白质的运动

C: 气泡能与蛋白质发生化学反应

D: 气泡会在装填凝胶的时候使凝胶不紧密

难度：简单题型:常考题来源：河南省郑州市十校2021-2022学年高二下学期期中联考生物试卷

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5．蛋白质的提取和分离是蛋白质研究的重要技术，以下叙述正确的是（）

A: 实验过程中可采用透析法将蛋白质与其他小分子杂质分离

B: 可选择猪、牛、羊、蛙等动物的血液为材料分离血红蛋白

C: 实验操作流程依次为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴定

D: 根据蛋白质的相对分子质量大小，可通过电泳分离蛋白质

难度：中等题型:常考题来源：广西南宁市三十六中2021-2022学年高二下学期期中生物试卷

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6．如图表示对某蛋白质溶液进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果（相似于纸层析法分离色素），下列相关叙述不正确的是（　　）

A: 蛋白质上某些基团解离后可使蛋白质带电，电场中带电的蛋白质分子（或多肽）会向着与其所带电荷相反的电极移动

B: 电泳结果表明溶液中蛋白质可能有两种，但也可能只有一种

C: 蛋白质在SDS-聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度基本取决于其分子量大小

D: 蛋白质在SDS-聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度完全取决于其所带净电荷多少

难度：中等题型:常考题来源：广西南宁市三十六中2021-2022学年高二下学期期中生物试卷

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7．蛋白质对生命活动来说是不可缺少的，人们要研究蛋白质，就得从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质。下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置。请回答下列问题：

根据图甲可知，这是采用法对血红蛋白进行分离的过程，此方法是根据蛋白质的不同来分离蛋白质的。在对甲图所示的凝胶柱进行装填时，一定要装填均匀，不能有气泡存在，因为气泡会。

图乙表示对分离出的血红蛋白进行的过程，此操作的目的是。

图丙为向色谱柱中加样的过程。操作先后顺序应为（用图中数字和“→”表示）。

经过丙图所示的操作，连接好缓冲液洗脱瓶，并以较为恒定的流速缓慢加入缓冲液。如果能看到凝胶色谱柱中的红色区带，说明色谱柱制作成功。在对蛋白质进行分离纯化后，还需要对得到的蛋白质进行分子量的测定，我们通常使用的是的方法，这种方法中，蛋白质的迁移率完全取决于。

难度：中等题型:常考题来源：广西南宁市三十六中2021-2022学年高二下学期期中生物试卷

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8．贵阳已经开始全力加强垃圾分类宣传，确保到2021年12月31日，全市每一个家庭、单位、企业、学校、农贸市场垃圾分类宣传全覆盖。垃圾分类时一定要把餐厨垃圾单独分装，因为餐厨垃圾的处理是非常重要的环节之一，图为利用餐厨垃圾养殖蝇蛆，提取蛋白粉过程。请回答相关问题：

废渣养殖红头丽蝇得到的蝇蛆成虫除主要作为高蛋白饲料原料外，还可从提取的蛋白粉中通过凝胶色谱法或（答出一种即可）等技术分离出凝集索和抗菌肽等不同种类的蛋白质，以实现高产值利用。采用凝胶色谱法分离凝集素（分子量为80000 ~ 335000KDa）和抗菌肽（分子量为2000~7000KDa）时，先洗脱出来的是，理由是。

利用凝胶色谱法分离凝集素和抗菌肽，在装填色谱柱时，为了加速凝胶颗粒的膨胀，可以将加入洗脱液的湿凝胶用加热，这种方法具有的优点（至少答出三点）。

为了检测提取的抗菌肽纯度是否达标，常用法进行蛋白质的纯度鉴定，抗菌肽在凝胶中的迁移率主要取决于。

难度：中等题型:常考题来源：云南省昆明市一中西山学校2021-2022学年高三下学期适应性月考（五）理综生物试卷

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9．研究人员利用鱼类肠道菌株MA35提取纤维素酶，按照“纤维素酶制备→纤维素酶纯化和鉴定→纤维素酶活力检测→纤维素酶酶学性质研究”的思路开展研究。回答下列问题：

从鱼类肠道中提取菌体后接种到中进行发酵培养，发酵完毕后将菌体与发酵液分离，菌体再加入缓冲液重新悬浮，利用超声波破碎细胞。制备纤维素粗酶液的思路是。

对获得的纤维素粗酶液用凝胶色谱柱进行洗脱，该方法纯化纤维素酶的原理是。纯化后的纤维素酶使用的方法进行纯度鉴定。

测定酶活力时，需要以的酶液作为对照组。实验组酶液加入羧甲基纤维素钠溶液，反应30 min后终止反应，以每分钟释放1 mmol所需要的酶量作为1个酶活力单位。设置30~80℃，pH为3.0~10.0的条件进行纤维素酶酶学性质研究，主要目的是。

难度：中等题型:模拟题来源：河南省新乡市2022届高三上学期第一次模拟考试理综生物试卷

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10．随着人类基因组计划的进展和多种生物基因组测序工作的完成，人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。对蛋白质进行研究时，首先要获得纯度较高的蛋白质。下图是某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中初步提取血红蛋白，设计的“血红蛋白提取、分离流程图”：

请回答下列有关问题：

样品处理中红细胞的洗涤要用反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是。

血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是，若要尽快达到理想的透析效果，可以（写出一种方法）。

电泳利用了待分离样品中各种分子的等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。

一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如上图所示。由图可知携带者有（1种或2种）种血红蛋白，从分子遗传学的角度作出的解释是。

难度：中等题型:常考题来源：贵州省安顺市三中2021-2022学年高三生物第一阶段测试试卷

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