已知某细菌的两种突变类型细菌Ⅰ和细菌Ⅱ的营养条件和菌落特征都相同，但细菌Ⅰ能分解有机物A而不能分解有机物B，细菌Ⅱ能分解有机物B而不能分解有机物A．现有这两种类型细菌的混合液样品，要将其分离，有人设计了一种方案，部分操作步骤如图．

（1）步骤一使用的是牛肉膏蛋白胨培养基，其中含有细菌生长所需的水、等营养物质（至少写出3种）；该培养基是[ ]（多选）．

A．固体培养基    B．液体培养基    C．通用培养基    D．选择培养基

（2）步骤一采用 接种，此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可能形成单个、独立的 ， 最终可能得到纯种的细菌；步骤二各瓶中的培养基加入了A、B两种有机物的目的是 ．

（3）无论是培养基（液），接种前除了要调节pH外，都必须对培养基进行；接种时必须在超净工作台及酒精灯火焰附近操作，原因是 

（4）步骤三中，若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物含量进行测定，预测可能的结果并推测结论：

①A与B两种化合物含量都明显下降，说明瓶中同时存在细菌Ⅰ和细菌Ⅱ，两者未分离．

② ．

③ ．

（5）经步骤三后，若所有瓶中培养液的A、B化合物含量测定结果都如55题中①的情况，则应 ， 再测定各瓶中A、B两种化合物的含量，直到分别获得每种类型细菌为止．

Ⅰ．细菌常被应用于生产生活中，如有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的细菌．

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上．为筛选出高效菌株，可比较单菌落周围清晰区域的大小．一般情况下，如图中清晰区域越大说明 ．

Ⅱ．另一同学将第一步筛选得到的甲、乙、丙三种细菌分别接种到A、B、C三种培养液中，经培养后分别测得它们繁殖一代所需的时间，结果如表所示：

注：“﹣”表示细菌没有生长．

（2）在A培养基中增殖较快的细菌是 ． 丙细菌可以在C培养液中繁殖却无法在B培养液中繁殖，原因是 

（3）由于微生物的营养类型复杂，不同的微生物对营养物质的需求是不同的．如果培养能进行光合作用的微生物，培养基中的营养物质是 （多选题），

A．碳源    B．氮源    C．生长因子    D．无机盐     E．水

Ⅲ．下面是有关某细菌G的四项实验：

实验1：将G接种于一般培养基上，结果出现菌落．

实验2：用一定剂量的紫外线处理G，产生突变种g1．将g1接种于一般培养基后，不出现菌落；但在培养基内添加营养物质甲后，就出现菌落．

实验3：用另一剂量的紫外线处理G，得突变种g2，将g2接种于一般培养基后，也不出现菌落；但在培养基内添加营养物质乙后，就出现菌落．

实验4：将g1和g2一起接种于一般培养基上，数日后出现菌落．

（4）细菌g1和g2分别接种于一般培养基，均不能生长．其原因是用紫外线处理导致细菌G发生了 ，从而缺乏合成营养物质甲或乙的酶．

A．基因突变     B．基因重组     C．染色体畸变     D．不可遗传变异

（5）实验1至3表明，物质甲和乙均是细菌G在代谢过程中产生的代谢产物．在实验2和3 中，它们是作为 加入一般培养基的．

A．碳源     B．氮源        C．生长因子      D．无机盐

（6）实验4中出现菌落的原因可能是 ．

回答有关微生物的问题．

人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值．为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究．请回答下列问题：

（1）在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是 （填序号）．

①酒精灯     ②培养皿     ③显微镜     ④无菌水

（2）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是  ．

（3）为达到筛选的目的，应采用选择培养基，本项研究中培养基配置的关键在于 ．

（4）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应．研究人员在刚果红培养基平板上，筛选到了几株有透明降解圈的菌落（见图1）．图中降解圈大小与纤维素酶的 有关．图中降解纤维素能力最强的菌株是 （填图中序号）．

（5）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J₁和J₄ ， 在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见图2．推测菌株 更适合用于人工瘤胃发酵，理由是 

植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解．刚果红（CR溶液）可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应．用含有CR的培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的透明圈．

为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了如下培养基（成分见下表）：注：“+”表示有，“﹣”表示无．

（1）据表判断，培养基（“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ；配制培养基时，在各种成分都熔化后灭菌前，要进行的是 ．实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是 

（2）在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是  （多选）．

A．酒精灯        B．培养皿          C．显微镜         D．无菌水

E．无菌滴管      F．接种环          G．玻璃刮铲

（3）有同学在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落如图1． 图中降解纤维素能力最强的菌株是 

（4）教师用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4，在不同温度条件进行纤维素分解发酵，测得发酵液中酶活性的结果见图2，推测菌株 更适合夏季分解植物桔杆，理由是 

硝化细菌包括亚硝酸菌和硝酸菌，广泛存在于通气性较好的土壤中，在自然界氮循环中具有重要作用．土壤或水体中的有机物（如动物的排泄物或动植物的尸体）在分解过程会产生对动物毒性很强的氨，硝化细菌可将氨或铵盐氧化为易被植物吸收的硝酸盐．具体过程如图1：

（1）根据上述材料可知，硝化细菌在生态系统中的营养类型是 

A．自养需氧型   B．自养厌氧型   C．异养需氧型   D．异养厌氧型

（2）硝化细菌通常以方式增殖，当水体过于纯净时，硝化细菌会形成休眠体，这种休眠体被称为 ．

（3）对于混有硝化细菌、蓝细菌和大肠杆菌的悬浮液，可利用选择培养基进行微生物筛选．在筛选硝化细菌时，其培养基成分包括

（以下材料供选择：H₂O、葡萄糖、纤维素、牛肉膏、（NH₄）₂SO₄、KNO₃、无机盐、琼脂、伊红﹣美蓝染料），接种后并培养．制备培养基时，灭菌与调pH值的先后顺序是 ．如利用上述培养基筛选大肠杆菌菌落，则应另外添加的成分是 ， 菌落特征为 ．

（4）将采集自养殖池中的水样1ml稀释100倍，然选取稀释后的水样1ml，接种于上述硝化细菌选择培养基上培养．该实验接种所使用的工具是 ．一段时间后观察菌落并计数，实验重复三次结果如图2，则该养殖池每毫升水含有硝化细菌 个．

科学家采用“影印培养法”研究微生物的抗药性突变是自发产生的还是在环境因素的作用下产生的．具体操作步骤如下：

①首先将大量对链霉素敏感的大肠杆菌涂布在不含链霉素的培养基平板1上，待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基平板2上，随即再影印到含有链霉素的培养基平板3上．经培养后，在平板3上出现了个别抗链霉素的菌落．

②对培养皿2和3进行比较，在平板2上找到与平板3上相对应的抗性菌落，挑取其中一个菌落接种至不含链霉素的培养液4中，经培养后，再涂布在平板5上．

③重复以上各步骤，最后在试管12中获得了较纯的抗性菌落．

根据以上材料回答下列问题：